寒兰杂交后代快速繁殖体系及生理生化研究

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非共生萌发和快速繁殖体系是杂交育种的重要环节,对培育国兰新品种有着极其特殊的意义。本文以寒兰和建兰所得种子为材料,探究杂交种子的萌发;并以根状茎为材料,系统地分析基础培养基、植物生长调节剂、活性炭等对寒兰和建兰杂交后代增殖、分化、生根的影响,现已建立起一套高效可行的组织快繁流程。在此基础上,又对杂交寒兰不同阶段的生长材料的生理生化变化以及与双亲之间的差异进行了初步研究。结果如下:1.寒兰快速繁殖体系:在无菌体系中,地生兰杂交组合(寒兰×建兰)经历了从种子、原球茎、根状茎发芽到生根成苗的过程。杂交寒兰种子萌发最佳培养基配方为:1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+活性炭1.0 g/L+蛋白胨2.0 g/L+琼脂7.0 g/L+蔗糖30.0g/L;最佳根状茎增殖培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 5.0 mg/L+胰蛋白胨2.0g/L+活性炭1.0g/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂7.0g/L;最佳分化培养基配方:B5+6-BA3.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+胰蛋白胨2.0g/L+蔗糖30.0g/L+琼脂7.0 g/L;最佳生根培养基配方:B5+活性炭0.5 g/L+NAA2.0 mg/L+胰蛋白胨2.0 g/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂7.0g/L。2.杂交寒兰的生理生化:杂交寒兰不同发育阶段中生理生化参数的结果:①随着发育过程的推进,不同发育阶段下的杂交寒兰营养生长材料各生理指标都发生了明显的变化。②可溶性糖和可溶性蛋白的含量均先减少后增多,叶绿素呈类“N”型的上升趋势。两者与叶绿素含量之间存在一定规律性变化。③POD与SOD大体呈下降趋势,而CAT活性呈上升趋势,三种抗氧酶相互协作保持植物体内氧化系统的相对平衡。此外,在与亲本的比较研究中,杂交后代的各项生理指标均介于两个亲本之间。①叶绿素含量、可溶性糖、可溶性蛋白、CAT活性:母本>杂交寒兰>父本;②SOD活性、POD活性:父本>杂交寒兰>母本。
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