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本研究选取高羊茅四个品种的成熟种子为材料,对高羊茅的再生体系进行了优化,以此为基础建立了胚性悬浮细胞系,对单细胞培养方式进行了比较,并以悬浮细胞为材料优化了原生质体分离的条件,以期能在短时间内获得大批高质量的原始材料,为高羊茅的基因工程和细胞工程奠定良好的理论和实践基础。主要结果如下:1.为建立高羊茅的高频再生体系,本实验对比了高羊茅四个品种的愈伤诱导率:‘千年盛世’、‘猎狗5号’、‘爱瑞三号’和‘交战Ⅱ号’。结果表明,‘千年盛世’的出愈率和胚性愈伤诱导率最高,分别为63%和36.8%,并且在继代过程中其愈伤状态表现最好。2.高羊茅离体植株再生的各个阶段,所适宜的培养基各不相同。初生愈伤组织诱导阶段,适宜的培养基为A1（MS+2,4-D 9mg/L+KT 0.1mg/L+Cu2SO4·5H2O 2.5mg/L）和B1（MS+2,4-D 9mg/L+CH 300mg/L）培养基,出愈率分别达到64.2%和65%。在胚性愈伤组织诱导阶段,适宜的培养基为B2（MS+2,4-D 5mg/L+CH 400mg/L+蔗糖60g/L+琼脂12g/L）培养基,其胚性愈伤诱导率达32%。分化再生阶段,以添加了脯氨酸的C3（MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+Pro 500mg/L）培养基出苗率最高,绿苗率达到85.71%,白化率仅为14.29%。生根培养基以1/2MS为宜。3.建立了来自高羊茅2个品种的3个胚性悬浮细胞系。为保持悬浮系的良好状态,细胞起始密度（细胞密实体积）选在1.0ml-3.0ml/40ml之间为宜,继代周期一般为5-7d,适宜的pH值范围在5.0-5.7之间,肌醇浓度以300mg/L为宜。4.高羊茅单细胞大小约为50-100μm,取对数生长期的悬浮细胞经200目过筛后即可得到由单细胞组成的悬浮液。比较三种培养方式对单细胞再生愈伤组织的影响,以悬浮培养效果最好,其细胞生长量、圆细胞率和细胞分裂率分别为150%、69.57%和57.01%,在培养第3d即有肉眼可见的愈伤组织生成。5.以悬浮细胞为材料进行原生质体的分离,分别对预处理时间、细胞状态、酶液组合、渗透压调节剂浓度和酶解时间进行了比较。结果表明,选择悬浮培养3d的细胞,用13%甘露醇预处理2h后低速振荡酶解8h的分离效果较好,酶液组合选用2.5%纤维素酶+0.6%果胶酶+11%甘露醇。6.原生质体纯化方法采用过滤-低速离心法,离心前需先用CPW-11M溶液按1:2的比例稀释过滤酶液,离心速度为1000rpm。