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全世界每年约有500万人因为癌症而死亡,其中结肠癌是常见恶性肿瘤之一。西方人结肠癌发病率较高,而在过去几十年间里,包括我国在内多数国家和地区结肠癌发病率也呈现上升趋势。寻找能够特异性抑制结肠癌细胞增殖或促进其凋亡的药物及药物组合并揭示其作用机制是国内外研究的热点之一。该领域的研究成果具有重要的理论意义和应用价值。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL能够特异性杀伤肿瘤细胞而对正常细胞几乎无毒副作用,是一种良好的抗肿瘤希望药物,在临床应用上也已经取得了很好的效果。但是多种肿瘤细胞对TRAIL表现出抗药性,使得TRAIL在肿瘤治疗中的应用受到限制。因此,如何采用药物联合的方式来克服肿瘤细胞对TRAIL的抗药性显得十分重要。本文探究蛋白N糖基化抑制剂衣霉素在恢复肿瘤细胞对TRAIL敏感性中的作用及其作用机制。首先采用MTT法检测抑制N糖基化药物衣霉素与TRAIL协同抑制人结肠癌细胞HCT116和HT29增殖的作用。结果表明,衣霉素能显著增强TRAIL对结肠癌细胞增殖的抑制作用。采用western-blot检测发现衣霉素能诱导细胞膜表面TRAIL死亡受体DR5表达上调,且对另一死亡受体DR4有明显的去糖基化作用。进一步采用siRNA干扰肿瘤细胞DR5和DR4的表达,发现DR5 siRNA处理肿瘤细胞后衣霉素与TRAIL的协同作用显著降低,而DR4 siRNA处理细胞后,两者协同作用无显著变化。这表明DR5在衣霉素与TRAIL协同中起到重要作用。深入研究衣霉素上调DR5表达的机制发现内质网源性转录因子CHOP是上调DR5表达的上游调控因素。因为采用CHOP siRNA处理细胞后,可以显著抑制DR5上调。进一步研究发现采用JNK磷酸化抑制剂SP600125处理结肠癌细胞可以显著抑制由衣霉素诱导的CHOP上调进而抑制DR5的上调。以上结果表明在结肠癌细胞中衣霉素是通过激活JNK信号通路激活诱导CHOP表达上调,进而引起DR5表达上调。此外,我们还发现衣霉素可通过引发EGFR去糖基化进而引起EGFR通路中p-ERK、p-AKT下调来增强结肠癌细胞对TRAIL的敏感性。综上,我们的研究表明抑制蛋白N糖基化药物衣霉素可通过JNK-CHOP途径上调DR5表达以及EGFR去糖基化进而与TRAIL协同诱导结肠癌细胞的凋亡。