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鼻咽癌是我国华南地区最常见的恶性肿瘤之一，流行病学调查和病因学研究显示，其发病与环境、遗传、EB病毒感染等因素的作用密切相关，但具体的分子机制尚不清楚。
MicroRNA(miRNA)是一类长约19nt～23nt的单链非编码RNA，广泛存在于植物及动物中，具有物种及组织特异性，进化上高度保守。miRNA可与其靶mRNA的3’非翻译区(3’untranslated regions，3’-UTRs)特异性结合，引起靶mRNA的翻译抑制或降解，在细胞的生长、分化及死亡过程中发挥癌基因或抑癌基因的作用。本研究拟应用miRNAs芯片筛选原代培养的鼻咽癌细胞差异表达miRNAs，并寻找差异表达miRNAs调控的靶基因，为进一步研究其在鼻咽癌发病机制中的作用打下基础。
材料和方法
取原代培养的鼻咽癌细胞和正常鼻咽上皮细胞，Trizol法抽提总RNA并分离出miRNA；将Cy3荧光标记的miRNA进行miRNA芯片杂交反应：采集芯片原始信号值并将图像信号转化为数字信号，导入Cluster 3.0进行聚类分析和SAM筛选差异表达miRNAs；应用定量RT-PCR方法验证miRNA芯片结果的可靠性。运用靶基因预测软件并结合全基因组表达谱芯片结果预测差异表达miRNAs可能调控的靶基因，并对靶基因进行Western blot验证。结果miRNAs芯片结果显示，鼻咽细胞中有存在一些高表达的miRNA，这些miRNA包括let-7家族，miR-21，miR-23，miR-24，miR-29a等；相对于正常鼻咽粘膜上皮细胞，鼻咽癌中miR-203、miR-503、miR-424、miR-141和miR-148a表达下调，而miR-25、miR-195和miR-15a表达上调，其差异表达均在2倍以上；荧光定量PCR结果与miRNAs芯片的结果较符合；在鼻咽癌下调表达的miR-203，其预测的靶基因为CCNG1和SPARC，Western blot结果显示，其在原代培养的鼻咽癌细胞亦高表达。
结论
鼻咽癌细胞中存在差异表达miRNAs，这些miRNA包括miR-203、miR-503、miR-424、miR-141、miR-148a、miR-25、miR-195和miR-15a等，提示这些miRNA可能与鼻咽癌的发生、发展有关，可作为鼻咽癌的候选标记物；应用靶点预测软件预测鼻咽癌细胞差异表达miRNA靶基因，发现它们靶点非常广泛，涉及到癌基因，细胞周期调控，细胞分化，转录调控，信号转导通路基因等；CCNG1和SPARC可能是miR-203调控的靶基因之一。