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目的:研究维生素K3对慢性粒细胞白血病细胞株(K562)诱导凋亡的作用
方法:配置不同浓度的维生素K3溶液(12.5umol/L、25umol/L、50umol/L、100umol/L)分别作用于K562细胞,并在不同的时间采用MTT(四甲基偶氮唑盐法)法测维生素K3对K562细胞增殖的抑制作用,通过形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡,测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量,探讨维生素K3对K562细胞内GSH水平的影响。所得数据进行统计学分析。
结果:从形态方面观察,维生素K3有诱导K562发生凋亡的作用。MTT法对细胞抑制率的测定说明维生素K3可以抑制K562细胞增殖,抑制率分别为5.98±4.20%(48小时,50umol/L)、37.15±8.09%(72小时,50umol/L)、24.82±5.13%(48小时,100umol/L)、65.25±24.15%(72小时,100umol/L),且具有浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测结果说明:K562细胞的正常凋亡率在5.61±0.40%(48小时)、5.84±0.24%(72小时)左右,而加维生素K3(50umol/L、100umol/L)处理后,流式细胞仪检测的结果表明凋亡率明显增加,分别达15.73±0.45%(48小时,50umol/L)、28.44±0.49%(72小时,50umol/L)、51.08±0.02%(48小时,100umol/L)、62.51±0.62%(72小时,100umol/L),且具有浓度和时间依赖性。细胞内GSH含量测定结果表明:12.5umol/L和25umol/L维生素K3作用于K562细胞72小时内细胞内GSH含量变化无显著性差异;50umol/L和100umol/L维生素K3作用于K562细胞72小时内细胞内GSH含量变化存在显著性差异。
结论:本实验表明维生素K3能抑制K562细胞增殖;维生素K3可以诱导K562细胞凋亡,且呈明显的时间-剂量依赖性,差别显著,P<0.05;维生素K3诱导K562细胞凋亡与细胞内GSH水平下降有关。