猪圆环病毒2a和2b亚型灭活疫苗及亚单位疫苗的交互免疫研究

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猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的主要病原.根据国际病毒学分类规定将PCV2分为PCV2a.PCV2b和PCV2c三个基因亚型。PCV2流行病学调查及遗传变异分析研究表明,2004年前流行的毒株以PCV2a亚型为主,近年的流行毒株则以PCV2b亚型更多,存在从PCV2a向PCV2b转型的流行态势。本研究通过鼠体免疫攻毒试验和猪体试验,评价PCV2a和PCV2b两种不同基因型毒株间的交叉免疫保护,该研究为PCV2流行及疫苗防控提供科学依据。本研究采用PCV2a-LG和PCV2b-YJ株制备了2种病毒灭活疫苗,及其重组杆状病毒表达的2种Cap蛋白(PCV2a-rCap和PCV2b-rCap)亚单位疫苗。选用8周龄BALB/c鼠165只,随机分成11组,每组15只,用上述4种疫苗各免疫2组,以PCV2a或PCV2b毒株攻毒。4种疫苗组于免疫第3w抗体转阳,第5w抗体效价达到1:200-1:800,其中PCV2a-rCap免疫组抗体效价最高。2种灭活苗和PCV2a-rCap免疫组攻击同型或异型毒株均可获得完全保护。中和试验结果表明,同型毒株与同型血清的中和抗体效价略高于异型毒株。病理观察显示,免疫鼠均未见明显病理变化,攻毒对照鼠肺脏出现一定程度的病理损伤。本研究表明,2种全病毒灭活疫苗及PCV2a-rCap蛋白亚单位疫苗可对PCV2a和PCV2b毒株提供交叉免疫保护,而PCV2b-rCap蛋白亚单位苗免疫效果不理想,有待进一步证实。为进一步在猪体评价PCV2a和PCV2b两种基因型毒株之间的交互免疫,本研究制备了PCV2a-rCL.PCV2b-rYJ及PCV2a/2b重组毒株PCV2ab-rJF灭活疫苗。选用35日龄的PCV2核酸和抗体检测均为阴性的健康仔猪45头,随机分为9组,每组5头,用上述3种灭活疫苗各免疫2组,同设2组攻毒对照组和1组健康对照组,随后分别用PCV2a-rCL.PCV2b-rYJ毒株进行攻毒试验。结果表明,PCV2ab-rJF和PCV2a-rCL灭活疫苗组于免疫后第3w抗体转阳,第5w抗体效价达1:400-1:1600。而PCV2b-rYJ灭活疫苗诱导的抗体水平低于1:200。攻毒后,灭活苗免疫组相对平均日增重率可达18.22%-20.18%,显著高于攻毒对照组(P<0.05)。病毒血症检测结果显示,攻毒后灭活苗免疫组均未检测到病毒血症,而攻毒对照组于攻毒后21d-28d出现病毒血症。病理学剖检结果显示,攻毒对照组中淋巴组织损伤程度明显严重于灭活苗免疫组(P<0.05)。脏器病毒载量结果表明,攻毒对照组中腹股沟淋巴结病毒载量高达7.08×101。拷贝/g,而疫苗免疫组中病毒载量少于4.51×105拷贝/g。本研究表明,PCV2a和PCV2b两种基因型间可提供有效的交叉保护,PCV2a/2b重组毒株PCV2ab-rJF灭活疫苗可对PCV2a和PCV2b基因型毒株提供有效的免疫保护力,且免疫效果最优。
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