胡萝卜抗冻蛋白基因启动子pafp功能及抗冻蛋白基因转化绿巨人的研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SHANGTIEYING
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
抗冻蛋白(antifreezeproteins,AFPs)是一类能控制冰晶生长和抑制冰晶之间发生重结晶的蛋白质,能在结冰或亚结冰条件下保护生物体不受伤害。从胡萝卜中分离并克隆了抗冻蛋白(DcAFP)基因及其启动子pafp。前期的实验表明,在双子叶植物烟草中,pafp是一个组成型表达的强启动子,其平均表达活性比35S高约4倍,有作为构建植物表达载体的启动子的潜力。为了进一步探讨掘其应用价值,本研究将连接有pafp的载体pC1381-pafp转入单子叶植物水稻中,检测pafp的启动子活性。GUS定量分析结果显示pafp在单子叶植物水稻中的活性是Actin的1/3,35S的44.63倍,同样是一个较强活性的启动子,此外,通过将pafp反方向连接报告基因Gus,构建了pC1381-pafp载体,并转化烟草,GUS定性分析结果表明反向pafp也具有启动子活性,以上结果显示pafp对植物表达载体的构建具有较高的应用价值。可以考虑将其应用于植物表达载体的构建。 由于胡萝卜中抗冻蛋白(DcAFP)的表达是冷诱导性的,但我们分离的启动子元件pafp并无冷诱导性。因此推测pafp上游可能存在冷诱导相关元件,于是本研究设计染色体步移实验得到一段上游序列,并做了初步分析,后续实验可以通过连到pafp上游检测有无冷诱导性,寻找相关的冷诱导元件。 本实验室前期的研究表明,转入DcAFP基因的烟草与野生型烟草相比,抗冷性有了很大的提高。为了使热带观赏植物绿巨人适应我国北方寒冷的气候,将胡萝卜抗冻蛋白(DcAFP)基因转入绿巨人中,得到经潮霉素筛选的转基因植株小苗,经过炼苗移入盆中栽培,与同时移入盆中的野生型绿巨人相比,叶片颜色更深,生长较为缓慢。通过抗冷实验表明,在10℃和4℃的低温条件下,转基因绿巨人的抗冷性较野生型植株都有了明显的提高。这对于将热带植物引入温带甚至寒带有一定的实际意义和应用价值。
其他文献
目的 分析容桂街道学校水痘暴发疫情及其疫苗接种效果.方法 2017年10月至2018年1月,顺德区容桂街道某小学发生水痘暴发疫情,对该校内2642名小学生开展水痘发病与疫苗接种调查
在市场经济发展的背景下,医疗行业之间的竞争也加剧,为了实现自身的良好发展,各大医院在自身经济管理中也通过多种有效的途径来尽可能的降低成本,提高自身经济效益.全成本核
目的 分析药品分类管理制度对医院药剂科的影响.方法 我院药剂科自2018年2月起实施药品分类管理制度,选取药剂科180种常用药物进行研究,将实施前(2017年9月至2018年1月)的药
目的 本文主要研究对门诊糖尿病患者血糖控制中应用个体化糖尿病教育处方的影响.方法 以2017年3月至2018年3月中在我院接受治疗的100例糖尿病患者为本次研究对象,并对患者进
目的 探析临床护理安全管理中实行精细化管理的应用效果及其价值.方法 选取我院2017年1月至2018年1月收治的80例患者,随机分为观察组与对照组,各40例.对照组实施常规护理管理
在众多自适应滤波器中,频域自适应滤波器因为计算效率高的优点,非常适合需要高阶FIR滤波器的声回声抵消应用。本文基于现有的频域自适应滤波器,针对它在声回声抵消应用中所存在
X射线显微CT具有分辨率高、体积小、成像快速、完全三维体成像等优点,在现代生物医药研究、产品无损检测、新材料开发等领域都有广泛的应用。特别是近些年,随着新兴交叉学科分
随着动物胚胎工程技术的飞速发展,能否挖掘卵巢卵母细胞的潜力,获取更多质量优等的卵母细胞数量越来越成为制约体外受精、核移植、胚胎移植等后续研究发展的问题,卵母细胞冷冻保
媒体产业逐步进入数字化高清时代,媒体的高清数字化同时也带来了更大的存储数据量的压力。其使得目前的嵌入式存储系统暴露出性能、可靠性等方面的诸多问题,对嵌入式系统的数字
学位
目的 临床探究在手术室医院感染预防与控制中应用PDCA模式的效果和价值.方法 选取在2016年8月至2018年1月,本院收治的100例进行手术治疗患者为研究对象,将其随机分为对照组与