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Tc1转座子超家族广泛分布于细菌、真菌及昆虫等各种生物中，有些Tc1转座子超家族成员已经被开发为重要的遗传育种操作工具，如SB转座子已经作为基因治疗和转基因的介导载体得到广泛应用。pogo转座子是Tc1转座子超家族的重要成员，但对其分布、进化和活性研究报道很少。本研究通过硬骨鱼转座组注释，并在脊椎动物中针对Tc1转座子超家族的重要成员pogo转座子进行分布、进化和活性研究，以挖掘活性pogo转座子，研发自主知识产权的遗传操作工具，为动物转基因和基因治疗等研究提供技术支撑。主要研究内容如下: (1)通过生物信息学手段对9种硬骨鱼转座组进行注释。结果表明9种硬骨鱼类转座组大小和构成差异显著，其转座组含量从高到低分别为斑马鱼、矛尾鱼、青鳉鱼、花斑剑尾鱼、大西洋鳕鱼、三刺鱼、金娃娃、罗非鱼和红鳍东方纯，转座子含量和基因组大小呈正相关。DNA转座子在硬骨鱼类中具有多样性高和含量差异大的特点（0.50％-38.37％），是硬骨鱼类转座组差异的主要决定因素，其中hAT和Tc/Mariner超家族是硬骨鱼类主要的DNA转座子。RNA转座子在硬骨鱼类中也具有多样性高的特点，其中LINE转座子占硬骨鱼类基因组0.53％-5.66％，共检测到12个(I、CR1、L1、L2、R1、R2、Jockey、 RTE和Rex)超家族分布，其中L1、L2、RTE和Rex转座子扩增较为明显，LTR转座子除了在斑马鱼和三刺鱼中含量达到5.58％和2.51％，在大多硬骨鱼类基因组中的含量低于2％，在硬骨鱼类中共检测到6个LTR转座子(Copia、DIRS、ERV、Gypsy、 Ngaro和Pao)超家族分布，其中扩增最为明显的是Gypsy。而SINE转座子在硬骨鱼类中扩增最弱，仅在斑马鱼和矛尾鱼中分别达到3.28％和5.64％，在其它7个品种中低于1％。SINE中tRNA、5S和MIR三个超家族在部分硬骨鱼类中有一定程度扩增。本研究表明硬骨鱼类转座组具有多样性丰富、差异大的特点，转座组差异与硬骨鱼基因组大小有很强的相关，转座组是决定硬骨鱼基因组大小的重要因素。 (2)通过TBLAST程序对NCBI数据库中脊椎动物基因组比对发现pogo转座子主要分布在鱼类基因组中，其中在28个鱼物种中发现了pogo转座子的分布，在2种两栖动物（西方爪蛙和高山蛙）和4种爬行动物中发现了pogo转座子的分布，在鸟类和哺乳动物未能发现者典型的pogo转座子结构。pogo转座子在进化中衍生出POGK和POGZ功能基因，POGZ在脊椎动物中分布广泛，而POGK主要分布在哺乳动物中。POGK和POGZ功能基因含有保守的pogo转座酶DBD和DDE结构域，且DDE氨基酸残基高度保守，提示POGK和POGZ可能具有DNA酶活性。 (3)为验证人源POGK和POGZ在哺乳动物细胞上的活性，构建了pogo转座子介导的新霉素报告基因表达质粒pPG-PGK-NEO，及转座酶表达质粒pT2-CMV-POGK和pT2-CMV-POGZ，同时构建斑马鱼pogo转座酶表达质粒pT2-CMV-Pgase。将pPG-PGK-NEO与分别上述三个转座酶表达质粒共转染Hela细胞，通过G418筛选获得稳定表达Neo基因的阳性细胞，阳性细胞克隆数比较表明，pT2-CMV-POGK和pT2-CMV-POGZ组显著高于对照组，而pT2-CMV-Pgase组显著高于POGK、POGZ和对照组，提示pogo转座酶、POGK、POGZ基因均具有转座活性。 (4)为了进一步明确斑马鱼pogo转座酶PGase转座子时空表达特性，以PGase正、反义RNA为探针，对不同发育阶段的斑马鱼胚胎进行原位杂交，结果表明，PGase在胚胎早期发育各阶段具有表达活性，正向表达水平明显高于反向，且表达无明显组织特异性， 本研究表明，pogo转座子主要分布在鱼类、两栖类和爬行类动物中，具有较高的转座活性，且其衍生基因POGK和POGZ也具有转座活性。