白芨多糖及其硫酸酯对丹皮酚的包合及包合物的理化性质与生物学活性的比较研究

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在本实验室分离纯化丹皮酚的基础上,鉴于丹皮酚见光、受热易氧化分解的不稳定性质,分别采用β-环糊精和本实验室制备的白芨多糖以及白芨多糖硫酸酯将其包合。对包合物做出鉴定并比较研究了丹皮酚及其包合物在理化性质及生物学活性等方面的异同。在丹皮酚的包合试验中,采用了正交分析的方法优选了白芨多糖和白芨多糖硫酸酯包合丹皮酚的最佳工艺,白芨多糖包合丹皮酚的优化工艺为:物料比1:6,反应时间4h,温度30℃,包封率达29.38%,收得率74.29%;白芨多糖硫酸酯包合丹皮酚的优化工艺为:物料比1:6,反应时间3h,温度30℃,包封率达36.64%,收得率78.14%。在比较研究丹皮酚及其包合物理化性质异同的实验中,通过采用热差示分析仪和红外图谱确定包合物的形成,核磁共振氢谱对包合物作出比较,推测可能的主要包合位点。实验结果表明:丹皮酚的包合物已经形成并且确实增加了丹皮酚的稳定性。同时对首次单独使用白芨多糖和白芨多糖硫酸酯包合丹皮酚机理可能性作出探讨,以期为他们的生物学活性的叠加提供依据。在生物学活性方面,检测了丹皮酚及其包合物对植物病原菌的抑制作用,测定了它们清除超氧阴离子自由基、羟自由基的活性,抗红细胞溶血的作用,并用它们分别对猪油和葡萄进行了保鲜研究。测定贮藏期间葡萄的维生素C含量、酸度、失重率、超氧化物歧化物(SOD)以及脂氧合酶(LOX)活性等。 实验结果表明,丹皮酚及其包合物对植物病原细菌没有作用,对植物病原真菌有一定的抑制作用,并有一定的种属特异性;丹皮酚包合物比白芨和白芨多糖硫酸酯以及丹皮酚具有更强的清除.OH和O2·-的作用,抗红细胞溶血的作用也较强。400 μg/mL的包合物比丹皮酚对猪油的保鲜更加具有强的效果。而在葡萄保鲜中,丹皮酚的白芨多糖和白芨多糖硫酸酯包合物试验组比其余试验组具有更好的效果,在室温下,能够保持较好的鲜度和亮泽,生理变化延缓,营养成分损失较小,呼吸速率比较缓慢。在体外抑制肿瘤细胞生长的实验结果显示,丹皮酚及其包合物对肿瘤细胞的生长均具有一定的抑制作用,包合物的抑制作用和诱导Hela肿瘤细胞凋亡的作用较未包合的丹皮酚和单一的白芨多糖和白芨多糖硫酸酯的作用要强。丹皮酚白芨多糖硫酸酯包合物处理的Hela细胞有8.22%处于晚期凋亡状态,51.37%细胞处于早期凋亡状态,丹皮酚白芨包合物处理过的Hela细胞有7.50%处于晚期凋亡状态,42.41%细胞处于早期凋亡状态。
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