灵芝酸组分提取分离及其体内抗氧化、免疫活性活性作用研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:dx3386135
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自古以来拥有健康与长寿的身体就是所有人类的共同追求,抗衰老和健康早已成为社会共同的追求,而这两方面的根本在于抗氧化和提升机体免疫力。衰老主要源于机体的细胞氧化,部分起因于免疫方面的功能进行性下降。因此,抗氧化与维持机体正常免疫功能对延缓衰老与健康生活具有重要的意义。灵芝孢子粉是我国东北尤其是长白山知名的中药材,具有多种显著的生理活性。随着人们对生活质量越来越多的关注,灵芝孢子粉作为安全有效的保健品之一已成为越来越多的研究者的研究热点。本试验将生物酶(漆酶)解法与超声辅助结合起来提取灵芝孢子粉中的灵芝酸;借助design-expert软件,利用Plackett-Burman试验考察超声时间、提取次数、溶剂浓度、料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度和pH这八个因素对得率的影响,并从中筛选出四个主要因素,在此基础上,用Box-Behnken试验将工艺优化。将提取出的灵芝酸粗组分应用于亚急性衰老模型小鼠以及环磷酰胺诱导的免疫抑制模型小鼠试验研究,分析灵芝酸组分对两种模型小鼠相关指标的影响;旨在探明灵芝孢子粉中基本功效成分的具体功能,为深入地研究开发灵芝孢子等药食同源产品提供一定的科学依据。试验结果如下:1.通过Plackett-Burman试验与Box-Behnken响应面试验分析法进行回归分析,将影响得率的几个主要因素进行筛选及优化;主次排序依次为液料比、溶剂浓度、酶解时间、超声时间、加酶量、pH、酶解温度和提取次数;得出最佳条件为:超声时间3.2h,液料比64:1,溶剂用97%的乙醇,酶解时间1.2h,在此工艺下得到最高的灵芝酸得率,为1.685%。与初始设计相比,得率提高了1.4倍。2.抗氧化试验中,D-半乳糖连续皮下注射(ih)进行亚急性衰老小鼠造模;并同时设立GA高、中、低剂量组,VC阳性对照组,空白对照组和模型对照组,考察各剂量组灵芝酸对小鼠体内各相关指标的影响。结果表明,灵芝孢子粉中的GA组分能够明显升高小鼠血清、肝脏和脑组织中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-PX)活力和总抗氧化能力(T-AOC),降低脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,其中GA中高剂量组与模型组相比T-SOD、T-AOC、GSH-PX分别升高了9%、28%、65%以上,MDA降低了35%以上;说明GA对体内抗氧化效果有着显著的影响。3.免疫试验中,采用环磷酰胺腹腔注射(ip)法来构建免疫抑制小鼠模型;同时设立空白对照组,模型对照组,GA高、中、低剂量组,考察各剂量组灵芝酸对小鼠体内各相关指标的影响。结果表明,GA各剂量组与模型组相比碳廓清指数升高了23%以上,校正廓清指数升高了21%以上,中高剂量组脾脏指数与模型组相比均升高了24%以上,胸腺指数升高了31%以上,中高剂量组血清溶菌酶含量、酸性磷酸酶活力以及肝组织酸性磷酸酶活力与模型组相比均升高了16%以上;说明GA能不同程度提高免疫抑制小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、脏器系数、血清溶菌酶含量、酸性磷酸酶活力及肝脏酸性磷酸酶活力,有良好的免疫效果。
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