紫草素纳米颗粒的制备、性质及体外抗癌活性研究

• 作 者: 肖雄健
• 机 构: 南京大学
• 出 处: 南京大学
• 发表日期: 2006年期
• 关键词: 紫草素 纳米颗粒 抗癌活性 中医药 紫草提取物

紫草素是传统中医药中的一种特殊组分，对大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌、金葡菌及病毒有抑制作用。主要用于急性黄疸型或无黄疸型肝炎及慢性肝炎，也用于扁平疣等的治疗。此外，紫草素对癌症也有一定抑制作用。本文主要目的：1) 进行紫草素纳米微粒的制备及其载药纳米微粒的表征和体外特性的研究；2) 研究紫草提取物(有效部位)及其纳米颗粒的抗癌细胞活性。
实验利用溶剂扩散法将一种高分子聚合物(聚己内酯—聚乙二醇6000-聚己内酯)(PCL—PEG6000-PCL)制成纳米颗粒，研究了不同量聚酯对纳米颗粒形成以及纳米颗粒的稳定性的影响；并将紫草提取物作为药物载入纳米颗粒中，获得了载药纳米颗粒；进一步在模拟体温条件下，检测了载药纳米颗粒的体外释放以及不同时段下纳米药物的释放效率。在10 mg聚酯、2ml丙酮的配比下，通过聚酯溶于丙酮再混溶于水中而制得纳米颗粒溶液，溶液半透明且不浑浊，纳米微粒性质稳定。用10 mg PCL—PEG6000-PCL 聚酯和1.0 mg紫草提取物或紫草素制成的负载药物的纳米颗粒，包埋率可达67.4％，载药量为9.23％。并且，该纳米溶液半透明但不浑浊，性质稳定，不载药的纳米颗粒粒径在150 nm左右，载药纳米颗粒粒径在200 nm左右。体外释放实验结果显示该纳米微粒中的紫草宁可以缓慢释放20天以上。
本文还应用形态观察和MTT法探讨了该紫草素提取物对7721人肝癌细胞的抑制作用，分析了引起肿瘤细胞生长抑制作用的可能机理，结果表明，紫草提取物及其纳米微粒对7721人肝癌细胞的生长都具有明显的抑制作用，且对癌细胞的生长抑制作用随着给药浓度的升高而增强。紫草提取物的浓度在0.025μg/ml-250μg/ml时，对7721人肝癌细胞的生长抑制抑制率达23.5—77.2％；相应地，载药纳米微粒中紫草素提取物浓度在0.025μg/ml-250μg/ml时，对7721人肝癌细胞的生长抑制抑制率达24.4-69.6％。其中，紫草提取物及其纳米微粒在2.5μg/ml时，抑制率分别为51.3％和47.5％；高于2.5 μg/ml后，抑制率的提高均开始减缓。经紫草提取物处理后，肿瘤细胞都出现比较大的形态和结构的变化，体现在细胞生长被抑制、细胞数量减少、出现空泡、细胞皱缩和细胞破裂等。通过紫草物及其纳米颗粒的细胞毒实验的对比，发现载药纳米微粒的缓释功能可以更高效率的实现对肿瘤细胞的抑制。