BXSB狼疮鼠骨髓细胞凋亡的实验研究

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目的:系统性红斑狼疮(SLE)是一种以产生大量自身抗体和自身反应性细胞被激活为特征的自身免疫性疾病.其发病机制目前尚不清楚.它被称为系统性自身免疫性疾病的原型.近年来,国内外学者对难治性SLE患者进行造血干细胞移植(hematopoietic stem cells transplantation,HSCT)的治疗,取得了可喜的成果.实验表明SLE动物模型是自发诱导的,与基因密切相关,异常存在于造血干细胞,可以通过异体骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)缓解和治愈.综合临床和实验室研究,我们不难看出SLE的发病可能与造血干细胞的异常相关.该文通过在体外对雄性BXSB狼疮鼠骨髓细胞进行细胞培养,然后用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeled,TUNEL)检测BXSB狼疮鼠骨髓细胞的凋亡情况,从而在干细胞水平上探讨SLE的发病机制.同时我们用大黄素对骨髓细胞进行药物干预,观察其对骨髓细胞凋亡的影响,为探讨其可能的作用机理提供实验依据.方法:该实验取4月龄雄性BXSB狼疮鼠和雄性BALB/c小鼠各6只.从小鼠股骨提取骨髓细胞后,用台盼蓝染色法检测骨髓细胞的活性,计数.然后将骨髓细胞悬液加入六孔培养板,每孔加入等量的骨髓细胞.随机分为三组:对照组、大黄素Ⅰ组(大黄素终浓度为250μg/ml)、大黄素Ⅱ组(大黄素终浓度为500μg/ml).放入5﹪CO<,2>、37℃培养箱中培养24小时.收集骨髓细胞,用TUNEL法检测细胞的凋亡.结果:研究表明BXSB狼疮鼠骨髓细胞数量明显高于同龄BALB/c小鼠;而且BXSB狼疮鼠与同龄BALB/c小鼠相比,骨髓细胞数/小鼠体重之比也明显升高.BXSB狼疮鼠骨髓细胞中凋亡水平明显下降.大黄素不仅能明显促进BALB/c小鼠骨髓细胞的凋亡,而且也能明显促进BXSB狼疮小鼠骨髓细胞的凋亡.结论:该实验提示BXSB狼疮鼠的发病可能与骨髓细胞的凋亡异常相关;大黄素可以促进骨髓细胞的凋亡,从而改善BXSB狼疮鼠骨髓细胞凋亡受抑制的异常生理现象.
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