论文部分内容阅读
目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对体外培养人子宫内膜癌AN3CA 细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其可能存在的机制进行初步探讨。
方法:将不同浓度Res(0、12.5、25、50、100、200μmol/l)作用于AN3CA 细胞不同时间(12、24、48、72h),应用MTT 法检测Res 对细胞增殖的影响;应用倒置相差显微镜观察Res 作用后细胞形态学的改变;应用流式细胞术检测分析Res 对细胞周期分布和凋亡的影响;应用细胞划痕实验检测Res 对细胞迁移的影响;应用荧光实时定量PCR 检测Res 处理细胞后Bcl-2、Bax 和MMP-9 mRNA 的表达水平;应用Western Blot 法检测Res 处理细胞后PCNA、Bcl-2、Bax、ERK1/2 和p-ERK1/2蛋白表达水平。
结果:⑴Res 能明显抑制AN3CA 细胞增殖,并随着药物浓度升高和作用时间的延长而抑制作用增强,呈时间-剂量依赖性。⑵倒置相差显微镜下观察发现Res 处理组细胞生长明显受到抑制,细胞形态变圆,胞浆内颗粒增多增粗。⑶不同浓度Res 处理AN3CA 细胞,随着药物浓度升高G0/G1 期比例显著增加从45.374±1.089%上升至72.486%±2.123%,同时伴随S 期细胞数的减少(P <0.01);细胞凋亡率从2.42±0.635%上升至30.96%±2.041%(P <0.01),差异有统计学意义。⑷细胞划痕实验显微镜下显示Res 使AN3CA 细胞迁移运动力减弱。⑸与对照组比较,Res 能够下调Bcl-2 的mRNA 表达,上调Bax 的mRNA 表达,而MMP-9 的mRNA 表达未见改变。⑹Res 能够增加Bax 的蛋白表达,抑制PCNA,Bcl-2 和p-ERK 在蛋白水平的表达;在短时间内(0.5-1h),100μmol/l Res 能够激活ERK1/2 的磷酸化表达但随着作用时间延长(4-48h)其表现为抑制效应。
结论:Res 能够抑制AN3CA 细胞增殖、迁移、诱导细胞G0/G1 期阻滞和凋亡,发挥抗肿瘤效应。Res 可能是通过上调bax 和下调bcl-2 实现诱导凋亡,其抗肿瘤的作用机制可能与ERK1/2 通路失调相关。