【摘 要】
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脊椎动物中枢神经系统发育是一个复杂、有序、严谨的过程,受到一些细胞外信号分子如BMP、FGF、Wnt和细胞内表观遗传(Epigenetic)网络的共同调控。其中microRNAs发挥着重要作用
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脊椎动物中枢神经系统发育是一个复杂、有序、严谨的过程,受到一些细胞外信号分子如BMP、FGF、Wnt和细胞内表观遗传(Epigenetic)网络的共同调控。其中microRNAs发挥着重要作用,但其调控神经发育的功能和机制以及与其它表观遗传分子的相互作用仍待探明。我们实验室研究发现,小鼠胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ESCs)的体外分化也经历了从ESCs到上胚层干细胞(ES-derived Epiblast Stem Cells,ESD-EpiSCs),以及从ESD-EpiSCs到神经前体细胞(Neural Progenitor Cells,NPCs)两个阶段,可以很好的重现体内早期神经发育过程。我们利用这个体外神经分化系统和Solexa深度测序(deep sequencing)技术,得到了ESCs、ESD-EpiSCs和NPCs三个阶段的microRNA表达谱。结合生物信息学分析,我们筛选出了一组在干细胞神经分化中显著上调的microRNAs(Neural differentiation upregulated microRNAs,简称NDU-microRNAs)。进一步研究发现,多个NDU-microRNAs共同抑制神经元限制性沉默因子(NRSF/REST)的表达。其中miR-219作为这些microRNAs的中一员,其在ESCs神经分化过程中表达明显上调。我们发现miR-219正是通过抑制REST蛋白的表达而促进了ESCs神经分化,而抑制miR-219的功能则会削弱ESCs体外神经分化。进一步实验表明,miR-219促进神经分化的功能正是由REST蛋白所介导的。在鸡胚胎神经发育过程中, miR-219特异性地在神经管的Mantlezone(MZ区)表达,且其表达区域与REST互补;miR-219通过下调REST的表达,促进神经前体细胞向神经元分化。综上所述,我们得到了干细胞神经分化过程中microRNAs表达谱,还发现多个NDU-microRNAs共同调节REST的表达,其中miR-219通过下调神经前体细胞中REST的表达促进其向神经元分化。
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