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植物甾醇是一种结构类似于胆甾醇的物质,主要存在于植物油不皂化物中,天然植物甾醇种类繁多,主要包括β-谷甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇和菜油甾醇。大量流行病学资料和实验室研究显示,摄入植物甾醇与人群许多慢性病的发生率较低有关,如冠状动脉硬化性心脏病、癌症、良性前列腺肥大等。自2000年9月,美国食品与药物管理局通过了对植物甾醇的健康声明,含植物甾醇的人造奶油和色拉酱被列入功能食品以后,植物甾醇的研究与开发就受到了越来越多的重视。 目前,植物甾醇主要是从大豆脱臭馏出物中提取,从菜籽脱臭馏出物中提取和菜籽甾醇的组成、功能特性等研究鲜见报导。因此,本课题首先对植物甾醇的提取工艺进行了研究,特别是对酯化条件进行了优化,紧接着对粗甾醇进行纯化,获得纯度很高的植物甾醇。其次对植物甾醇的结构进行了分析。最后对植物甾醇的功能进行了初步研究和评价,主要包括植物甾醇对猪油的抗氧化实验和对高血脂症小鼠的防治实验。主要研究结果如下: 1.通过对菜籽油脱臭馏出物中主要成分的分析,得到菜籽脱臭馏出物中水分含量为2.2%;酸价112.2 mgKOH/g;游离脂肪酸56.3%;不皂化物20.01%;维生素E3.2%;菜籽植物甾醇16.4%。然后选择了即经济又合理的提取工艺路线,特别是对酯化条件进行了优化,实验结果证明:当料液比(菜籽油脱臭馏出物重量与甲醇体积之比w/v)为1:1,酯化时间为3.5h,酯化温度为65℃时,该工艺可使游离脂肪酸的酯化率高达98.43%。将实验所提取的粗甾醇分别用丙酮、无水乙醇、正己烷三种溶剂进行重结晶精制,实验结果表明:正己烷重结晶后纯度高达98.48%,但得率较低;无水乙醇重结晶后纯度为97.72%,得率66.12%;丙酮重结晶后的植物甾醇纯度最低,而且有二十八碳烷的富集现象。所以实验过程中多采用无水乙醇结晶精制植物甾醇。 2.粗菜籽植物甾醇得率。通过酯化反应、弱碱中和、水洗、油水分离、抽滤所得到的菜籽植物粗甾醇含量为55.28%,得率为12.31%。 3.用各种仪器设备对菜籽脱臭馏出物中植物菌醇进行了定性定量分析。利用特殊溶剂显色法、紫外光谱、红外光谱、GS一S对植物苗醇进行了结构鉴定,发现所提取的菜籽脱臭馏出物中植物街醇主要含有p一谷翻醇、菜籽幽醇、菜油幽醇。在定量方面,采用了毛细管柱气相色谱法,分别得出了混合植物苗醇、p一谷幽醇、菜籽幽醇、菜油幽醇的标准曲线。最后选用了反相液相色谱法对植物幽醇进行了分离,分离效果较好。 4.植物幽醇对猪油的抗氧化实验,采用了不同剂量的植物街醇和不同的协同增效剂对猪油的抗氧化进行了研究,以EDTA、维生素E、维生素C、柠檬酸·等增效剂作为空白对照。实验结果表明:植物幽醇对猪油有抗氧化作用,而且抗氧化效果随着剂量的增加而加强。在协同增效剂方面,EDTA效果最好,其次依次是维生素E、维生素C、柠檬酸。 5.植物出醇对高血脂症小鼠的防治作用。主要包括两部分:第一部分是植物幽醇对高血脂症小白鼠的预防实验。第二部分是植物凿醇对高血脂症小白鼠的治疗实验。在预防实验中,以喂基础饲料和高脂饲料的小白鼠作为对照组,同时还有药物对照组,实验组通过灌青不同剂量的植物幽醇(l .sm咖l、3.smghal、6.smg/inl),实验45天后测定各指标,并与基础组、高脂组和药物组相比较。实验结果表明:不同剂量的植物幽醇能降低小鼠血清的TC、LDL一C、MDA和动脉硬化指数赶。同时能升高SOD和增加粪重及促进粪脂代谢,但对TG、HDL一C不显著。植物笛醇还能减轻小鼠肝重和肝系数,降低肝脏中的TC、TG含量,且呈现剂量效应,有的剂量效果显著。在治疗实验中,以高脂组为对照组,通过灌胃药物血脂康(10mg/inl)、植物苗醇(lomg/ml),实验20天后测定各指标。结果表明:1 omg/ml的植物凿醇在降低高血脂症小鼠血清TC、TG、LDL一C、MDA、Al和升高SOD和增加粪重及促进粪脂代谢方面与高脂对照组相比效果显著,与药物组相比效果虽然要差,但没有明显差异,表明植物幽醇对高血脂症小鼠有良好的治疗作用。