【摘 要】
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以淀粉为主要碳源的发酵过程中,金色链霉菌细胞外分泌的淀粉酶主要将淀粉降解为二糖物质.菌体最大比生长速率达0.056h.细胞生长过程同细胞外淀粉酶的活力具有一定的相关性,在
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以淀粉为主要碳源的发酵过程中,金色链霉菌细胞外分泌的淀粉酶主要将淀粉降解为二糖物质.菌体最大比生长速率达0.056h<-1>.细胞生长过程同细胞外淀粉酶的活力具有一定的相关性,在菌体生长阶段,淀粉酶比活力和淀粉利用速率最高,分别为0.15u/g、2.8g·L<-1>·h<-1>.该研究构建了一包含25个代谢反应的金色链霉菌简化碳代谢网络,采用最优化方法求解了金色链霉菌代谢网络中碳代谢流量.摇瓶试验表明在低溶解氧浓度下,透明颤菌血红蛋白的表达,可提高金色链霉菌氧的利用效率,产物合成比原始菌株提高40﹪～60﹪.在模拟的局部低氧环境中,采用四环素抗性基因启动子带动血红蛋白基因表达,可有效发挥透明颤菌血红蛋白的功能,优于受溶解氧调控的透明颤菌血红蛋白基因天然启动子.利用四环素抗性基因启动子在金色链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因.在1m<3>发酵罐中研究了工程菌株的生长代谢特性.在溶解氧充足的条件下（≥30﹪的空气饱和度）,透明颤菌血红蛋白表达,对金色链霉菌生长代谢未产生明显影响,工程菌株与参比菌株的生长代谢特性基本一致,工程菌株和参比菌株金霉素最终浓度分别为22905u/mL、22896u/mL.在低溶解氧条件下（10﹪～12﹪的空气饱和度）,VHb的表达对金色链霉菌菌体生长和金霉素的合成有明显的促进作用.工程菌菌体浓度比参比菌株高5﹪～10﹪,金霉素合成提高11.4﹪.代谢流分析表明：低溶解氧条件下,与野生型菌株相比,在VHb表达的工程菌细胞内,碳在HMS途径的通量增高,有机酸累积速率降低.
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