小牛肠碱性酸酶在三氟乙醇溶液中的失活和构象变化;小牛肠碱性磷酸酶分子的不对称性

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该文研究在不同浓度三氟惭醇(TFE)溶液中,小牛肠碱性磷酸酶(CIP)的变性及其构象的改变,并与对应浓度的三氟惭醇(TFE)溶液中小牛肠碱性磷酸酶(CIP)活力的变化相比较.在该文采用的实验方法中,酶活力的测定用405nm处酶催化水解底物,单位时间内生成产物的吸光度值表示.通过监测405nm处吸光值,随时间的变化进行有关酶激活(或失活)反应的动力学研究.使用荧光分光光度计监测酶蛋白的内源荧光发射强度变化来研究酶的整体构象的改变.激发波长为295nm.用远紫外园二色谱(CD)检验酶二级结构的改变.通过远紫外CD光谱分析酶的二级结构,其在TFE变性中发生了一个显著的变化,揭示了酶所经历的去折叠过程.
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