共轭亚油酸对新生仔猪血管基底细胞中脂类生成的调控

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jenjen1985
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本论文通过3个体外试验研究了共轭亚油酸(coniugated tinoleic acid,CLA)对新生仔猪皮下脂肪和肌肉内血管基底细胞中脂类生成的影响。(1)为研究不同剂量混合型共轭亚油酸(CLA-Mix)对仔猪皮下和肌肉内血管基底细胞脂肪特异性基因表达的影响,试验选用7日龄仔猪的皮下脂肪组织和背最长肌组织,经胶原酶消化后获得两个部位的血管基底细胞,在体外进行培养。待细胞融合后,加入分化剂对其进行分化,并分别用牛血清白蛋白(bovineserum albumin,BSA:对照)、25和50 μmol/L 的CLA-Mix对细胞进行处理。处理6 d后,提取细胞总RNA,采用荧光定量PCR对脂肪特异性基因的表达进行分析。结果表明:25和50μmol/L的CLA-Mix均显著降低了皮下血管基底细胞中脂肪细胞决定与分化依赖因子1(adipocyte determination and differentiation factor-1,ADDl)、脂肪酸结合蛋白2(adipocytefattyr acid binding protein 2,aP2)、胰岛素受体(insulin receptor,IR)、脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)和过氧化物酶增殖子活性受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)基因的表达(P<0.05);同时提高了肌内血管基底细胞中ADD1、aP2、IR、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和PPAR7基因的表达(P<0.05),并且CLA对这些基因表达的影响存在剂量关系(P<0.05)。这表明CLA-Mix对皮下和肌内血管基底细胞脂肪特异性基因表达的调控存在差异。(2)为确定不同CLA异构体对皮下和肌肉内血管基底细胞脂肪特异性基因表达的影响,试验用浓度为50 μmol/L的c9,t11-CLA、CLA-Mix和t10,c12-CLA并以亚油酸(linoleic acid,LA)和BSA为对照,处理分化的皮下和肌内血管基底细胞。试验期为6 d,细胞培养结束后,提取细胞总RNA和总蛋白,对脂肪特异性基因在mRNA水平和蛋白水平的表达进行分析。结果表明:t10,c12-CLA显著降低了皮下血管基底细胞中ADD1、aP2、IR、LPL、PPARγ基因mRNA的表达,并且抑制了PPARγ蛋白的表达(P<0.05)。在肌内血管基底细胞中,c9,t11-CLA和t10,c12-CLA都提高了ADD1、aP2、IR、PPARγ、FAS基因mRNA及PPAγ蛋白的表达水平(P<0.05)。(3)为确定CLA对皮下和肌内脂肪前体细胞增殖和分化的影响,试验用浓度为50 μmol/L的c9,t11-CLA、CLA-Mix和t10,c12-CLA并以LA和BSA为对照,分别对分化前的细胞进行2 d,分化期的细胞进行3 d处理:并用免疫组化和油红染色的方法测定各个处理组脂肪前体细胞数目以及脂类物质的沉积量。结果表明:t10,c12-CLA显著抑制了皮下脂肪前体细胞的增殖和脂类物质沉积(P<0.05)。两种CLA异构体对肌内脂肪前体细胞的增殖都没有影响,但提高了肌内前脂肪细胞脂类物质的沉积(P<0.05)。这些结论表明:不同CLA异构体对皮下和肌内血管基底细胞中脂类生成的调控存在差异。
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