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兽药残留是影响食品安全的一个重要因素。仪器方法是检测兽药残留的常用方法，但由于耗时长、费用高，不适用于现场快速检测。而免疫分析方法具有灵敏度高、准确度好等特点，在样品筛查检测中的应用广泛。化学发光免疫分析是一种新型的免疫检测方法，灵敏度更高，对违禁药物残留检测更具优势。本文对化学发光体系进行研究，并将CLEIA方法应用到克伦特罗、氯丙嗪和孔雀石绿三种违禁兽药残留检测中，研制三种兽药的化学发光检测试剂盒，结合国内外常用方法来评价试剂盒的各个性能指标。主要的研究结果如下： (1)建立了化学发光体系。化学发光液的最佳组合：鲁米诺浓度为0.2 mg/mL；发光增强剂为对碘苯酚，其浓度为0.08 mg/mL；发光底物液pH8，4；氧化剂为过氧化氢，其浓度为0.39μL/mL；发光诱发液pH7.0；发光液稀释液为0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液。发光液在4℃环境中保质期约3个月。国产灰色化学发光板最适宜化学发光试剂盒的开发。 (2)研制了克伦特罗直接竞争CLEIA检测试剂盒。CLB-dcCLEIA方法检测限LOD为0.01 ng/mL，半抑制浓度为0.09 ng/mL，线性范围为0.02～7.59 ng/mL，线性方程为y=-22.680x+38.083，R2=0.9858。克伦特罗抗体与莱克多巴胺的交叉反应率为0.46％，与其他结构类似物或功能类似物之间的交叉反应率均小于0.1%。批内和批间变异系数分别为5.19%～11.92%和4.81%～11.48%，均小于15%。以尿样、肌肉组织、肝脏、饲料为检测对象，回收率均在80%～120%之间，样品基质对检测无显著影响。HPLC与CLEIA检测结果的相关性系数R2为0.987，表明本研究建立的CLEIA方法与HPLC方法具有较高的相符性。试剂盒在4℃保质期至少达到半年以上。 (3)研制了氯丙嗪间接竞争CLEIA检测试剂盒。CPZ-icCLEIA方法检测限为0.02ng/mL，半抑制浓度为0.12 ng/mL，线性范围为0.02～24.78 ng/mL，线性方程为y=-21.060x+49.493，R2=0.9949。氯丙嗪抗体与其他结构类似物或功能类似物无交叉。批内和批间变异系数分别为5.88%～12.09%和5.97%～10.3%，均小于15%。以尿样、肌肉组织、肝脏、饲料为检测对象，回收率均在80%～120%之间，样品基质对检测无显著影响。HPLC与CLEIA检测结果的相关性系数R2为0.9837，表明本研究建立的CLEIA方法与HPLC方法具有较高的相符性。试剂盒在4℃保质期至少达到半年以上。 (4)研制了孔雀石绿间接竞争CLEIA检测试剂盒。MG-icCLEIA方法的检测限为0.01 ng/mL，半抑制浓度为0.22 ng/mL，线性范围为0.03～3.27 ng/mL。线性回归方程为：y=-16.991x+33.460，R2＝0.9914。孔雀石绿抗体与亚甲基蓝、灿烂绿和结晶紫的交叉反应率分别为3.28%、2.61%和0.97%，与其他结构类似物或功能类似物无交叉。批内和批间变异系数分别为5.6%～10.7%和4.92%～11.5%，均小于15%。以水样、鱼、虾为检测对象，回收率均在80%～120%之间，样品基质对检测无显著影响。HPLC与CLEIA检测结果的相关性系数R2为0.9848。试剂盒在4℃保质期至少达到半年以上。 本文研制的三种兽药化学发光试剂盒与实验室研制的相应的ELISA试剂盒比较，检测灵敏度和检测限均有了较大的提高，特别是孔雀石绿CLEIA法，相比于ELISA法其检测灵敏度和检测限提高了2个数量级，显示出CLEIA分析方法在兽药残留检测试剂盒开发方面的良好前景。