叶黄素酯的提取及酶法合成叶黄素衍生物的研究

来源 :兰州理工大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:wuchen2007
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天然叶黄素酯是一种重要的类胡萝卜素脂肪酸酯。其稳定性优于游离态叶黄素,同时人体对它的吸收也同样优于游离态叶黄素,所以天然高纯度叶黄素酯在食品、保健品和药品上的应用将具有更加广阔的前景。本课题主要研究了固定化脂肪酶Novo435催化合成叶黄素酯。万寿菊为一年生草本植物,含有丰富的叶黄素酯。为了优化叶黄素酯的提取工艺条件,采用微波辅助,在单因素试验基础上,用响应曲面法对叶黄素酯提取率的4个主要影响因素,即提取温度、提取时间、液固比和微波功率进行了优化,建立并分析了各因子与叶黄素酯提取率关系的数学模型。结果表明:原料用量5 g,在提取温度40℃、提取时间20s、液固比20 ml/g、微波功率500 W时,叶黄素酯提取效果最好,在此条件下叶黄素酯的提取率达到14.595 mg·g-1。以叶黄素酯为原料,在超声条件下系统地考察了由叶黄素酯制备叶黄素的条件。在单因素试验的基础上,用响应曲面法对叶黄素的制备工艺进行优化,以液固比、超声皂化温度以及皂化时间为因素,分析了各因子与叶黄素得率的关系。确定最佳皂化反应条件是:皂化时间138 min、超声皂化温度48℃、液固比15 ml/g。在此条件下叶黄素得率达到75.8mg·g-1。在得到高纯度叶黄素的基础上,以叶黄素为原料,在脂肪酶Novo435的催化下,分别和油酸、咖啡酸、没食子酸、苦杏仁酸、L-丙氨酸、L-赖氨酸发生酯化反应,首次合成了叶黄素系列衍生物,并通过IR、13CNMR.1HNMR、MS对它们结构进行了表征。研究了脂肪酶催化叶黄素合成叶黄素酯的影响因素。考察了酶量、溶剂、体系水分、温度、时间等因素对酯化反应的影响。结果表明,适宜的工艺条件分别为:酶量10mg/ml,溶剂为氯仿,水含量80mg/g,温度45℃,反应时间30h,在上述条件下油酸转化率可达80.4%;酶量10mg/ml,溶剂为氯仿,水含量10mg/g,温度40℃,反应时间24h,在上述条件下咖啡酸转化率可达88%;酶量10mg/ml,溶剂为氯仿,水含量60mg/g,温度40℃,反应时间30h,在上述条件下没食子酸转化率可达81.8%;酶量10mg/ml,溶剂为氯仿水含量80mg/g,温度40℃,反应时间24h,在上述条件下苦杏仁酸转化率可达77.8%;酶量10mg/ml,溶剂为氯仿,水含量80mg/g,温度40℃反应时间30h,在上述条件下L-丙氨酸转化率可达81.8%;酶量10mg/ml,溶剂为氯仿,水含量80mg/g,温度40℃,反应时间30h,在上述条件下L-赖氨酸转化率可达80.4%。
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