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第一部分急性创伤性脑损伤患者血浆中HMGB1的表达及临床意义目的：探讨急性创伤性脑损伤患者血浆中高迁移率簇蛋白B1 (High-mobility group box 1,HMGB1)的表达以及临床意义。方法：选取2012年1月至2012年6月住院的急性创伤性脑损伤患者142例,轻度脑创伤组68例(GCS 13～15分)；中度脑创伤组48例(GCS 9-12分)；重度脑创伤组26例(GCS 3-8分)。所有患者均于伤后4-6小时内采集上肢静脉血,并采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)测定血浆中HMGB1的表达。并且选取同期体检健康正常者15例作为对照组。比较脑创伤组和对照组两者HMGB1的表达水平,并分析急性创伤性脑损伤患者伤后1个月内死亡和6个月内功能预后不良的危险因素。结果：急性创伤性脑损伤患者血浆中HMGB1水平均比对照组明显增高(P<0.01)；血浆中HMGB1水平与入院时GCS评分呈显著负相关(P<0.01)。单因素Logistic回归分析显示,血浆中HMGBl水平是急性创伤性脑损伤患者伤后1个月内死亡和6个月内功能预后不良的危险因素。ROC曲线分析显示血浆中HMGB1水平对急性创伤性脑损伤患者伤后1个月内死亡和6个月内功能预后不良有显著预测价值。结论：急性创伤性脑损伤患者血浆中HMGB1表达水平增高,且其增高的程度与脑伤情的轻重呈正相关,血浆中HMGB1的水平可作为评估脑创伤患者预后的一项重要观察指标。第二部分HMGB1在实验性大鼠急性创伤性脑损伤中的表达目的：探讨实验性大鼠急性创伤性脑损伤后HMGB1在血浆和脑组织中的表达情况,以及脑水肿和细胞凋亡情况。方法：大鼠随机分为7组：假手术组、脑创伤2h组、脑创伤6h组、脑创伤12h组、脑创伤24h组、脑创伤48h组、脑创伤72h组(每组12只),改良Feeney重物自由落体法建立大鼠脑创伤模型,ELISA检测血浆中HMGB1的表达,免疫组化染色观察HMGB1阳性细胞的表达,湿/干法测定脑水含量,TUNEL染色检测细胞凋亡。结果：血浆中HMGB1在假手术组为0.83±0.15ng/ml,伤后2h为3.50±0.57ng/m1(与假手术组相比P<0.01),伤后6h为7.87±0.60ng/ml(与伤后2h相比尸<0.01),伤后12h为7.85±0.59ng/ml,伤后24h为7.6l±0.66ng/ml(脑创伤6h组、脑创伤12h组、脑创伤24h组各组间相比尸>0.05),伤后48h为4.63±0.68ng/ml(与伤后24h相比P<0.01),伤后72h为3.11±0.66ng/ml(与伤后48h相比P<0.01);HMGB1阳性细胞在假手术组为7.49±1.76%,伤后2h为36.54±5.92%(与假手术组相比P<0.01),伤后6h为65.58±5.46%(与伤后2h相比尸<0.01),伤后12h为65.18±4.83%,伤后24h为64.68±4.09%(脑创伤6h组、脑创伤12h组、脑创伤24h组各组间相比P>0.05),伤后48h为43.17±4.48%(与伤后24h相比P<0.01),伤后72h为36.50±4.92%(与伤后48h相比P<0.01)；伤侧脑组织含水量在假手术组为79.21±0.96%,伤后2h为79.27±0.92%(与假手术组相比尸>0.05),伤后6h为81.00±0.85%(与伤后2h组相比P<0.01),伤后12h为82.26±0.95%(与伤后6h组相比P<0.05),伤后24h为83.54±0.93%(与伤后12h组相比P<0.05),伤后48h为82.31±0.50%(与伤后24h组相比P<0.05),伤后72h为81.22±0.88%(与伤后48h组相比P<0.05)；细胞凋亡在假手术组为6.62±1.38%,伤后2h为8.73±1.52%(与假手术组相比P>0.05),伤后6h为35.11±4.72%(与伤后2h组相比P<0.01),伤后12h为43.23±4.61%(与伤后6h组相比P<0.05),伤后24h为52.29±4.76%(与脑创伤12h组相比尸<0.01),伤后48h为39.91±4.66%(与脑创伤24h组相比P<0.01),伤后72h为32.56±4.85%(与脑创伤48h组相比P<0.05)。结论：大鼠脑创伤后血浆中HMGB1在伤后2h开始升高,伤后6h达到峰值,持续24h,伤后48h开始明显下降；大鼠脑创伤后2h HMGB1由细胞核向细胞质分布,伤后6h达到峰值,持续24h,伤后48h开始明显下降；大鼠脑创伤后6h伤侧脑组织含水量开始升高,至伤后24h达高峰,伤后48h开始有所缓解；大鼠脑创伤后伤后6h凋亡细胞逐步增多,伤后24h达到最多,伤后48h逐步减少。第三部分甘草酸苷对大鼠脑创伤后HMGB1表达的影响及其作用机制探讨目的：探讨甘草酸苷对大鼠创伤性脑损伤的神经保护作用和对高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)的影响。方法：雄性SD大鼠随机分为三组：假手术组、脑创伤组、甘草酸苷组(每组36只)。采用改良Feeney法建立大鼠脑创伤模型。在甘草酸苷组,伤后30分钟静脉注射10mg/kg甘草酸苷。伤后24小时行运动功能、脑组织含水量测定,同时在损伤部位周围的脑组织采样,用RT-PCR、Western blot、 EMSA和ELISA方法检测HMGB1/HMGB1的受体(TLR4和RAGE)/NF-κB的信号通路和炎性细胞因子,并且分析HMGB1、RAGE和TLR4免疫组化和细胞凋亡的情况。结果：脑创伤组明显引起运动功能障碍(与假手术组相比P<0.01),甘草酸苷组运动功能受损明显减轻(与脑创伤组比较,P<0.01)；损伤侧脑组织含水量在假手术组为79.97±0.82%,在脑创伤组为82.94±0.65%(与假手术组相比,P<0.01),在甘草酸苷组为80.97±0.49%(与脑创伤组相比,P<0.01)；创伤性脑损伤区周围脑组织HMGB1/HMGB1受体(TLR.4和RAGE) /NF-κB信号通路表达显著增加(与假手术组相比,各指标P<0.01)。甘草酸苷治疗后,HMGB1/HMGB1受体(TLR.4和RAGE)/NF-κB信号通路表达受到抑制(与脑创伤组相比,各指标P<0.05)；假手术组大鼠脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6的含量分别为39.48±5.67pg/mg、10.52±1.53pg/mg、5.38±0.82pg/mg,脑创伤组大鼠脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6的含量分别为79.57±5.17pg/mg、 18.94±1.45pg/mg、16.08±1.06pg/mg(与假手术组相比,各指标P<0.01),甘草酸苷组大鼠脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6的含量为62.02±5.54pg/mg、15.25 ±1.52pg/mg、11.60±0.90pg/mg(与脑创伤组相比,各指标P<0.01)；.在假手术组HMGB1、RAGE和TLR4阳性细胞及凋亡细胞分别为7.98±1.44%、5.60±1.12%、7.60±1.29%、8.19±1.46%,在脑创伤组HMGB1、RAGE和TLR4阳性细胞及凋亡细胞分别为58.37±5.06%、54.15±4.65%、65.50±4.83%、52.02±4.63%(与假手术组相比,各指标P<0.01),在甘草酸苷组分别为39.99±4.99%,34.87±5.02%,43.33±4.54%,37.84±5.16%(与脑创伤组相比,各指标P<0.01)。结论：甘草酸苷下调大鼠创伤周围脑组织HMGB1/HMGB1受体(TLR4和RAGE)/NF-κB介导的炎症反应,减轻继发性脑损伤,改善大鼠脑创伤的预后。我们的研究表明甘草酸苷对大鼠创伤性脑损伤具有神经保护作用。