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目的:观察多激酶抑制剂PKC412对人结直肠癌的体内和体外作用,进一步探索PKC412抗结直肠癌的分子机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、台盼蓝(Trypanblue)染色法、细胞集落实验(Clonogenicityassay)检测PKC412对结直肠癌细胞存活、死亡和增殖的影响。应用Annexin V-碘化丙啶(PI)流式细胞仪法及Histone DNA ELISA法检测PKC412对结直肠癌细胞凋亡的影响;Caspase试剂盒方法、Westerm blot法检测PKC412对Caspase活性及表达水平的影响,检测Caspase抑制剂对PKC412抗结直肠癌细胞作用的影响。通过PI流式细胞仪法观察PKC412对结直肠癌细胞周期的改变。通过敲低Bc1-2或过表达Bc1-2,探讨Bc1-2对PKC412的抗结直肠细胞作用的影响。应用Western blot检测PKC412对结直肠癌细胞AKT活化水平的影响;导入持续活化的AKT质粒(CA-AKT1)恢复AKT活性后,观察PKC412抗结直肠癌细胞活性的变化。建立裸鼠移植瘤模型,观察PKC412体内抗结直肠癌细胞的作用,并用免疫组化法(IHC)检测AKT的活化水平。结果:PKC412时间剂量依赖性地抑制人结直肠癌细胞的存活和增殖,促进癌细胞死亡。PKC412浓度依赖性地诱导结直肠癌细胞的凋亡,并增强了 Caspase-3和Caspase-9的活性及上调其表达;Caspase抑制剂减弱了 PKC412抗结直肠癌细胞的作用。PKC412诱导结直肠癌细胞G2-M周期停滞。Bc1-2抑制剂ABT-737或siRNA敲低Bc1-2可强化PKC412抗结直肠癌细胞的作用;反之,Bc1-2过表达则抑制PKC412诱导的细胞毒作用。PKC412阻断结直肠癌细胞内AKT的活化,而导入持续活化的AKT质粒则可抑制PKC412的细胞毒作用。在裸鼠移植瘤模型中,口服PKC412(100 mg/kg体重,每日)显著抑制HT-29移植瘤的在体生长,且伴有瘤组织内AKT活性水平下降。结论:新型多激酶抑制剂PKC412通过抑制结直肠癌细胞存活及增殖、促进细胞凋亡及G2-M周期阻滞发挥抗肿瘤活性,PKC412抗结直肠癌活性可能与抑制AKT的活性有关,Bc1-2可能是PKC412的主要拮抗因子,PKC具有潜在的治疗结直肠癌的价值。