原发性高血压不同中医证型患者AT1R基因多态性与内外环境交互作用的分子流行病学研究

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目的:观察原发性高血压(essential hypertension, EH)各证型患者血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensin Ⅱ type1receptor, AT1R) A1166C及T573C基因多态性的分布规律,同时观察高血压患者的血压、体重指数、血脂、血糖、生活习惯、临床生化指标、肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)相关血管活性物质等内外环境因素。通过分析ATIR基因两个位点与内外环境因素的交互作用,探讨该基因位点在EH不同证型分子流行病规律,为中医药防治高血压提供新的思路和方法方法:1.依据《中国高血压防治指南2010》的诊断以及排除标准,筛选安徽中医药大学第一附属医院400例患者作为EH组,并按照《中药新药临床研究指导原则》中高血压辨证分型标准,高血压分为肝火亢盛证、阴虚阳亢证、痰湿壅盛证、阴阳两虚证4型,每型100例.另外选取健康对照组100例,均为同期健康体检者。2.利用调查表记录年龄、性别、吸烟、饮酒、家族史等一般情况;测量血压(采用汞柱血压计)、身高、体重,并计算体重指数(BMI=体重/身高2)检测临床生化指标:血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、血糖(glucose, GLU)、低密度脂蛋白(low density poprotein Cholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein Cholesterol,HDL-C)(采用自动生化分析仪测定)3.用酶联检测法测定血清中血管紧张素原(angiotensinogen, AGT)、血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)及血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)水平4.用多重高温连接酶检测反应基因分型技术(iMLDR, improved multiple ligase detection reaction)检测全血中ATlR基因A1166C及T573C位点多态性。5.利用多因素降维分析法(multifactor dimensionality reduction, MDR)分析内外环境因素与ATlR基因多态性交互作用对EH不同证型的影响。结果:1.本研究结果显示高血压组与正常对照组之间在饮酒、饮食、家族史、收缩压、舒张压、体重指数、空腹血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、有显著差异(P<0.05);在各证候组之间,性别、饮食习惯、家族史、收缩压、舒张压体重指数、低度密度脂蛋白及血管紧张素原(AGT)分布具有显著差异性(P<0.05),其中肝火亢盛及痰湿壅盛舒张压水平明显高于阴阳两虚及阴虚阳亢组(P<0.01),痰湿壅盛LDL-C水平明显高于阴阳两虚组(P<0.01)。2.AGT、AngⅡ及ACE在高血压组与正常对照组之间存在显著差异(P<0.05);AGT在四个证候组间分布存在差异(P<0.05),其中阴阳两虚证AGT水平显著高于痰湿壅盛证(P<0.01),并与对照组比较存在明显差异(P<0.01),其在四个证候组间分布水平从高到低为:阴阳两虚型>肝火亢盛型>阴虚阳亢型>痰湿壅盛型。3.ATlR基因A1166C位点等位基因及基因型在EH组及正常组之间无显著差异(P>0.05),但A1166C位点AA及CA基因型在肝火亢盛与痰湿壅盛、肝火亢盛与阴阳两虚型之间存在差异(P<0.05),其余各组及等位基因比较均无差异(P>0.05);T573位点T等位基因及CT+TT基因型在EH组及正常组之间分布具有显著差异(P<0.05),T573C位点T等位基因型在正常组与阴阳两虚组之间比较存在差异(P<0.05),其余各组及基因型比较均无差异(P>0.05)。4.经MDR分析,痰湿壅盛组中LDL-C、体重指数、饮食习惯、饮酒与ATlR基因T573C位点组成的交互模型为原发性高血压痰湿壅盛证最佳诊断模型;阴阳两虚组中LDL-C、体重指数、饮食习惯、饮酒与ATlR基因T573C位点组成的交互模型为原发性高血压阴阳两虚证最佳诊断模型。肝火亢盛组中LDL-C与体重指数的交互模型为原发性高血压肝火亢盛证的最佳诊断模型;阴虚阳亢组中饮食习惯因素的单因素模型为原发性高血压阴虚阳亢证的最佳诊断模型。将痰湿壅盛证及阴阳两虚证最佳诊断模型中环境因素两两组合与ATlR基因两个位点进行交互作用分析发现:痰湿壅盛证中饮酒、饮食习惯及LDL-C与T573C位点交互作用更密切,体重指数偏向于单因素影响痰湿壅盛证发生;阴阳两虚证饮食习惯、体重指数及LDL-C与T573C位点的交互作用更密切,饮酒因素偏向于单因素影响阴阳两虚证发生。结论:1.饮酒、过量饮食等不良生活习惯以及家族史与高血压的发病有关联。2.AGT、ACE及AngⅡ在EH发病过程中起重要作用,AGT可能与EH阴阳两虚证形成有关。3.ATlR基因A1166C位点多态性与安徽合肥地区汉族人群高血压发病可能无关,但与EH证候差异形成有关;ATlR基因T573等位基因可能是合肥地区汉族人群EH的易感基因,携带T573T基因型及T573C基因型合肥地区汉族人群可能更易患EH,T573等位基因可能与安徽合肥地区汉族人群EH阴阳两虚证发病有关。4.内外环境因素之间的交互作用是EH不同证候形成内在因素;其中ATlR基因T573C位点与内外环境因素交互作用对EH痰湿壅盛及阴阳两虚证形成具有重要作用。
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