【摘 要】
:
农药伴随人类改造自然、征服自然已有一百多年的历史,在植物保护中发挥了巨大的作用,促进了农业发展,给人类带来了巨大的经济效益。然而使用农药所引起的副作用,如:病虫草产生抗药性、对非靶标生物的直接毒害、对环境的污染等,已成为了农业生产上迫切需要解决的问题。二十世纪70年代基因工程技术的出现,为解决这些问题提供了新的途径与思路。Harpins是革兰氏阴性植物病原细菌通过Ⅲ型泌出系统分泌的一类能诱导非寄主
论文部分内容阅读
农药伴随人类改造自然、征服自然已有一百多年的历史,在植物保护中发挥了巨大的作用,促进了农业发展,给人类带来了巨大的经济效益。然而使用农药所引起的副作用,如:病虫草产生抗药性、对非靶标生物的直接毒害、对环境的污染等,已成为了农业生产上迫切需要解决的问题。二十世纪70年代基因工程技术的出现,为解决这些问题提供了新的途径与思路。
Harpins是革兰氏阴性植物病原细菌通过Ⅲ型泌出系统分泌的一类能诱导非寄主植物过敏反应和系统获得抗性的非特异性蛋白激发子。本研究采用PCR方法从水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)RS105菌株中扩增harpin<,Xooc>编码基因hrf2,将其克隆到酵母表达载体pPICZαA的分泌信号肽基因下游,获得重组表达质粒pPICZαA-hrf2。重组表达质粒线性化后电击转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)宿主菌X-33,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌X-33/pPICZαA-hrf2。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵上清液经浓缩后进行SDS-PAGE电泳分析,在约18 kD处有特异目标条带出现。Westem Blot检测表明表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明酵母重组表达蛋白harpin<,xooc>能够诱导烟草产生过敏反应和促进烟草生长,活性高于在大肠杆菌中表达的harpin<,Xooc>。
aiiA基因编码的N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)水解酶(AiiA蛋白)能降解细菌产生的AHLs信号分子,干扰该信号分子参与细菌群体感应的调控过程,抑制多种植物病原菌致病基因的诱导表达,从而减轻或消除病原菌的致病性。本实验根据已报道的aiiA基因序列设计引物,从枯草芽胞杆菌中成功扩增出一段长为753 bp的序列,测序后经blast比对,结果表明与已发表的aiiA基因序列相似性均在85%以上。将此基因克隆到pET30(a)表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,超量表达的蛋白在菌体中以包涵体形式存在;AiiA蛋白经SDS-PAGE电泳检测,表达产物分子量为28 kD。
其他文献
氮素污染给人类和环境带来了极大的危害。短程硝化/厌氧氨氧化工艺作为污水脱氮处理的工艺之一,包含AOB主导的氨氧化过程及AnAOB主导的Anammox过程,处理成本低、脱氮效率高,应用前景广阔。在脱氮过程中,通过固定化技术将微生物固定,可有效防止菌体流失,提高抗冲击性能,具有效率高、反应易控制等优点。本文针对短程硝化及Anammox过程的启动及运行的问题,分别进行了试验,以期为一体化工艺的应用提供一
作为固定化酶组成的一部分,载体材料的结构和性质对固定化酶的性能有着巨大的影响。由于载体材料的重要性,自固定化酶技术兴起以来,很多学者就一直致力于对载体材料的研究。随着科学技术的发展,固定化酶载体材料也从开始的天然高分子材料发展到有机高分子材料,无机材料以及目前的复合材料如磁性高分子微球等。由于磁性高分子微球同时兼具高分子微球的众多特性和磁响应性,在外加磁场作用下可以方便地分离而在固定化酶方面获得了
一、本研究以贵州大学水稻研究所提供的同核异质不育系WA质426A×59(1152)、WA质新香A×59(1154)、WA质珍汕97×59(1157)、K质59A(1153)、G质59A(1155)、D质59A(1156)及其保持系59B(1151)为材料,对6个不育系的农艺性状分析、育性进行了比较研究;主要结果如下:1、株叶形性状。在6个不同质源的不育系中,分蘖力以K质59A最强,D型不育系分蘖力
水土流失严重和生产力水平低下是黄土高原西部半干旱旱农区发展的主要制约因素。黄土质地疏松,抗蚀能力差,雨量少而集中,是造成该区水土流失严重和土地生产力水平低下的自然原因,而传统农业的精耕细作更加剧了水土流失,限制了生产力水平的提高。因此,采取适宜的保护性耕作措施,增加有机质的归还率,尽量减少农田水分的非生产性消耗,提高水分的生产效率,既可以提高生产力水平,又可以减少水土流失,改善生态环境。而要在黄土
枇杷具有极高的营养价值、经济价值和药用价值。但枇杷果实中的种子大而多,约占整个果实的30%左右,极大地降低了枇杷果实的可食率,因此影响了其食用价值和商品价值。如何减少枇杷的种子数量,尽可能达到无核,是枇杷生产和育种研究中迫切需要解决的课题。 目前获得无核枇杷主要有两条途径:第一条是自身为无核品种。这主要是通过自然筛选、二倍体与四倍体杂交和人工诱导等方式产生三倍体无核枇杷。这方面的研究已经取得了很
本试验以津春四号为试验材料,在CO2加富条件下,研究高温处理对温室黄瓜光合作用、保护酶活性及叶片解剖构造的影响。试验结果表明:1、CO2加富高温的条件下黄瓜依然可以维持较高的光合速率,在14:00时可达17μmol·m—2·s-1 CO2是CK处理光合速率的2倍。2、在中午高温阶段CO2加富高温处理的叶片气孔开启数多于关闭数。说明在CO2加富高温条件下,可以减轻甚至打破“午休”现象。3、在CO2加
畜禽粪尿NH挥发及其沉降所带来的环境污染已成为全球关注的热点问题,并逐渐成为环境外交的重要议题。目前国内对畜禽粪尿NH挥发的研究多集中在某些具体环节(如畜舍)的微观尺度上,而缺乏宏观尺度上对粪尿“从产生至还田”整个过程中NH挥发的系统研究。为此,本研究以猪、奶牛粪尿NH挥发为研究对象,在查阅文献资料和实地调研的基础上,运用养分流及RAINS模型的理念,以“畜舍(放牧)-储藏-农田施用”为链条,系统
温室气体引起的全球变暖和平流层臭氧损耗是当今重大的全球性环境问题。CO、CH、NO是三种最主要的温室气体,农田生态系统是重要的温室气体排放源。研究管理措施对农田温室气体排放的影响及其机理是编写温室气体排放清单的基础,是制定合理的减排措施的前提,具有重要意义。为研究管理措施(氮肥施用、种植制度和耕翻措施)对农田土壤呼吸、NO和CH排放的影响,采用静态暗箱-气相色谱法对典型农田生态系统的土壤呼吸、NO
小麦是我国第二大粮食作物,也是我国北方最主要的粮食作物,其丰欠程度直接影响到人民的生活水平和国民经济发展。然而,在决定小麦产量形成的灌浆期,常常遭遇连续高温和强光的双重胁迫,导致光合机构破坏,叶片功能过早衰退,灌浆不充分,造成产量下降、品质变劣。因此,研究高温强光对小麦光合机构的破坏机理及防护措施,对于提高小麦产量和品质,增加农民收入,稳定物价水平,全面建设小康社会具有重要理论与实际意义。研究表明
长白山自然保护区生态系统保存完整,自然环境复杂多样,生物资源极其丰富。随着海拔、气候、土壤等综合因素的影响,该保护区北坡地带的植物、动物、微生物(包括真菌)具有明显的区系分布特点。通过对长白山北坡森林土壤真菌的分类研究,可明确其真菌种群多样性及分布规律,筛选大量食用、药用、工业用等有益真菌,并为长白山自然保护区的管理及其微生物资源的进一步开发利用提供科学的理论依据。分别于2006年6月、8月赴长白