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目的：通过动物和人体实验证实复方枳棋子(complex Semen Hoveniae, Radix Puerariae and Fructus Schisandrae, SRF)的解酒保肝作用。方法：(1)动物实验：小鼠被用于复方枳棋子提取物(SRF Extract, SRFE)的药效学研究。实验小鼠被分为空白对照组、自身对照组、模型对照组、小、中、大剂量给药组和阳性对照组。自身对照组按大剂量给予SRFE,小、中、大剂量给药组分别按0.06、0.12、0.24g/kg给予SRFE,阳性对照组给予海王金樽(Hai-Wang-Jin-Zun, HWJZ),各组按上述方法连续处理14天,末次灌胃后1h,模型对照组、小、中、大给药组和阳性对照组按7.7g/kg给予40%乙醇。给酒后立即观察小鼠醉酒情况,12h后处死动物,取其肝脏检测肝脏抗氧化酶活性及脂质过氧化产物的含量。大鼠被用于研究SRFE对乙醇代谢的影响。大鼠的分组和给药方式与小鼠相同,小、中、大剂量给药组分别按0.04、0.08、0.16g/kg,自身对照组按0.16g/kg给予SRFE,阳性对照组按0.25g/kg给予HWJZ,模型对照组、小、中、大给药组和阳性对照组按4.5g/kg给予40%乙醇。分别在给酒后0、0.5、1、2、6h,大鼠经尾静脉取血,检测血清中乙醇和乙醛的含量,12h后,处死动物,取其胃、小肠粘膜和肝脏,用于检测其中乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase, ADH)活性和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase, ALDH)含量,以及肝细胞色素P4502E1(cytochrome P4502E1, CYP2E1)活性。最大耐受量实验：小鼠被分为空白对照组和药物处理组,在24h内,药物处理组以复方枳棋子胶囊(SRF capsule, SRFC)的填充物按最大浓度(2g/mL)和最大给药体积(20mL/kg)灌胃给药2次,空白对照组给予等体积蒸馏水。给药后48h密切观察动物,随后连续观察至给药后14天,记录动物的一般情况和死亡情况及毒性反应。(2)人体实验：15名经酒量筛选的健康成年男性共进行3次间隔1w的平行实验,第一次为仅饮酒的乙醇对照实验,第二、三次在双盲条件下,每人在饮酒前30min各服用一次安慰剂和一次SRFC。每次实验于饮酒后的0、70、100min检测心率,于饮酒后的20、50、70、100和120min抽血,检测血清乙醇和乙醛的含量,以及ADH和ALDH含量。结果：(1)动物实验：SRFE给药组能剂量依赖性延长小鼠翻正反射消失时间,缩短翻正反射恢复时间,降低醉酒发生率(P<0.05,P<0.01)；大鼠血清中乙醇的达峰时间(time to peak concentration, Tmax)不变,达峰浓度(peak concentration, Cmax)和曲线下面积(area under the curve, AUC)则剂量依赖性降低(P<0.05,P<0.01),乙醛的Tmax提前(P<0.05),Cmax和AUC降低(P<0.01)；SRFE预处理大鼠的胃、小肠和肝脏的ADH和ALDH水平均呈剂量依赖性上升趋势(P<0.05,P<0.01)；SRFE给药组可剂量依赖性抑制乙醇所致的CYP2E活性升高(P<0.01)；SRFE能够逆转乙醇所致的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)和谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase, GST)的活性抑制(P<0.05,P<0.01),降低丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量(P<0.05,P<0.01)。最大耐受量实验：受试药组小鼠给药24h内体重略降,饮食状况不佳,自主活动量减少,行动略显迟缓,大便颜色变深,小便未出现明显异常；24h后小鼠体重回升,饮食状况正常,自主活动量恢复到正常水平,二便正常,给药后14天各组均无动物死亡,与对照组相比,受试药组小鼠体重、毛色、饮食状况、自主活动量、行动能力、二便情况均未见差异。(2)人体实验：三组受试对象饮酒后心率均呈现出先上升再回落的趋势,给药组饮酒后心率变化率减低(P<0.01,P<0.05),安慰剂对照组无改变；给药组血乙醇和血乙醛的浓度-时间曲线均处于乙醇对照组的下方,与乙醇对照组相比,给药组血乙醇和血乙醛Tmax无改变,Cmax和AUC降低,ADH和ALDH含量升高(P<0.01,P<0.05),安慰剂对照组各项指标均无改变。结论：SRF具有解酒和护肝的抗急性酒精中毒作用,其作用机制与抑制乙醇吸收、促进乙醇的ADH代谢途径、抑制乙醇的CYP2E1代谢途径,提高肝脏抗氧化功能有关。在成人每日推荐量(0.03g/kg)的2600倍下,SRFC的急性毒性低,安全性高。目的：通过细胞水平实验,证实SRF的抗急性酒精性肝细胞损伤作用,血清药理学实验证实含药血清的药理学活性。方法：(1)SRFE药效实验：将大鼠原代肝细胞与不同剂量SRFE(1、10、100和1000μg/mL)孵育12h,或与1000μg/mL SRFE孵育不同时间(0、3、6、12和24h)后,给予100mmol/L乙醇孵育6h,检测指标包括：培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)和谷草转氨酶(Glutamic-oxalacetic transaminase, GOT)活性,四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-Dinetyl-2thiazolyi)-2, MTT)法检测乙醇所致细胞抑制率,肝细胞乙醇代谢酶ADH活性,以及肝细胞抗氧化酶SOD、CAT、GPx活性和谷胱甘肽(glutathione, GSH)、MDA含量。(2)血清药效实验：动物分为空白对照组和SRFC给药组,制备空白血清和含药血清血清。分离大鼠原代肝细胞,细胞分为空白对照组、含药血清对照组、模型对照组、空白血清对照组和含药血清处理组,研究含药血清在急性酒精暴露模型下对肝细胞的保护作用。将大鼠原代肝细胞与不同剂量含药血清(5%、10%、20%)孵育24h,或与20%含药血清孵育不同时间(12、24、48h)后,给予100mmol/L乙醇孵育6h,收集培养基和细胞,检测细胞活力、乙醇代谢酶ADH活性,以及肝细胞抗氧化酶SOD、CAT、GPx活性和GSH、MDA含量。结果：(1)SRFE药效实验：SRFE处理组各项指标均可见剂量和时间依赖性改变：与模型对照组相比,培养基中LDH和GOT活性降低(P<0.01,P<0.05),细胞的抑制率降低(P<0.01,P<0.05),细胞ADH、SOD、CAT、GPx活性升高(P<0.01,P<0.05),GSH含量升高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01)。(2)血清药效实验：与模型对照组相比,含药血清处理组培养基中LDH和GOT活性降低(P<0.05),乙醇对细胞的抑制率降低(P<0.01),SOD、CAT、GPx活性和GSH含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.01),但各组细胞ADH活性均未见明显改变；含药血清对照组细胞培养基中的LDH、GOT活性以及细胞抑制率不变,但它在急性乙醇暴露下对肝细胞有一定的保护作用。结论：SRF具有抗急性酒精性肝细胞损伤作用,其作用机制与提高肝细胞活力和功能、促进乙醇的ADH代谢途径、提高肝脏抗氧化功能有关。含药血清具有相似的药理活性,其作用机制与提高肝细胞的抗氧化功能相关。目的：寻找SRFC的活性物质基础,为其质量控制提供理论依据。方法：(1)SRFC的指纹图谱研究：称取胶囊内容物0.1g,加入10mL甲醇溶液,超声提取30min,过滤,滤液经微孔滤膜过滤,滤液注入C18色谱柱,以0.2%磷酸：乙腈为流动相,梯度洗脱：9：1(5min)→7：3(15min)→7：3(30min)→9：1(40min)→9：1(50min)；流速1mL/min；检测波长250nm,确认样本中的主要成分并计算其含量。(2)含药血清的成分分析：大鼠按2.4g/kg给予SRFC内容物,给药后40min,经颈动脉取血,1体积血清和5体积甲醇混合,涡旋60s后于冰上静置5min。重复此操作2次,然后在室温下下以3000rpm离心5min,吸取上清液,氮气吹干后加入甲醇复溶,微孔滤膜过滤后按前文所示方法进行HPLC分析,确定样本中的主要成分并计算其含量。结果：(1)SRFC的指纹图谱研究：得到分离度良好的色谱峰数量大于30个,指认其中6个为：葛根素(633.040μg/mL)、芦丁(6.232μg/mL)、槲皮素(62.585gg/mL)、山奈素(10.213μg/mL)、五味子醇甲(131.265μg/mL)、五味子乙素(0.560gg/mL)。(2)含药血清的成分分析：共分离得到5个色谱峰,其中2个峰分别为葛根素(4.073μg/mL)和五味子醇甲,其他3个峰的归属可能为次生代谢产物。结论：黄酮类成分葛根素和木脂素类成分五味子醇甲可能为复方枳棋子胶囊的活性物质基础,并将其中的标志性成分葛根素作为复方的质量评价标准。