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现代研究表明，钩藤药材中的有效成分为吲哚类生物碱，其中以钩藤碱（IRN）和异钩藤碱(RIN)为主，临床上应用较为广泛，如高血压、癫痫、心律失常、焦虑等，故研究其含量测定方法显得尤为重要。本论文在对生物碱的分析方法、离子液体在高效液相色谱分析中的应用进行综述的基础上，以流动相常用添加剂三乙胺作为对照，建立了以离子液体为流动相添加剂分离钩藤药材中钩藤碱和异钩藤碱的高效液相色谱分离方法，并进行方法学考察和验证。 分别设计合成了具有不同烷基链长度、不同阴离子的离子液体1-丁基-3-甲基咪唑氯盐([BMIM] Cl)、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐（[BMIM]BF4）、1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)、1-己基-3-甲基咪唑氯盐（[HMIM]Cl）和1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐（[HMIM]BF4），并利用1HNMR谱图确证了其结构。 以流动相常用添加剂三乙胺作为对照，建立了以离子液体为流动相添加剂分离钩藤药材中钩藤碱和异钩藤碱的高效液相色谱分离方法。以分离度及保留因子等为指标，考察了离子液体中咪唑阳离子烷基链长度、阴离子的种类、离子液体的浓度、流动相pH和流动相比例对钩藤药材中钩藤碱和异钩藤碱分离测定的影响。结果显示，咪唑阳离子的烷基链长度、阴离子的离液序列显著影响钩藤碱和异钩藤碱的分离度及保留因子，以选择[HMIM][BF4]为流动相添加剂的分离效果最好，分离度为2.27、保留因子分别为6.37和5.05。优化的色谱条件为:[HMIM][BF4]浓度16 mmol/L，流动相甲醇与磷酸盐水溶液体积比37∶63，pH3.0，钩藤碱和异钩藤碱能够实现基线分离，满足样品测定的分离需求。初步探讨了离子液体作为流动相添加剂影响分离效果的机制。 通过对线性关系、灵敏度、精密度、重复性、稳定性等一系列的考察，对其进行方法学验证。结果显示:钩藤碱和异钩藤碱均在1.56μg/mL～100.00μg/mL浓度范围内有良好的线性关系;钩藤药材中的钩藤碱和异钩藤碱的平均回收率分别为99.9％、99.6％;检测限(LOD)分别为0.914μg/mL、0.194μg/mL;测得钩藤碱和异钩藤碱的日内精密度RSD值分别为1.40％和0.62％、日间精密度RSD值分别为1.83％和1.09％。此方法准确、可靠，具有分离效果好，多组分同时测定的特点，可用于实际样品中钩藤碱和异钩藤碱的测定。