【摘 要】
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布鲁氏菌是胞内寄生的革兰氏阴性球状杆菌,由布鲁氏菌（Brucella）引起的人畜共患病被称为布鲁氏菌病（Brucellosis,简称布病）。Omp25和Omp31均为布鲁氏菌外膜蛋白的第三组外膜蛋白。Omp25可以结合其余外膜蛋白无法识别的特殊的抗体表位,Omp31是有效的保护性抗原,可以诱导体液免疫和细胞免疫应答。所以,以Omp25和Omp31为包被抗原,建立一种血清学检测诊断方法具有重要的实际
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布鲁氏菌是胞内寄生的革兰氏阴性球状杆菌,由布鲁氏菌（Brucella）引起的人畜共患病被称为布鲁氏菌病（Brucellosis,简称布病）。Omp25和Omp31均为布鲁氏菌外膜蛋白的第三组外膜蛋白。Omp25可以结合其余外膜蛋白无法识别的特殊的抗体表位,Omp31是有效的保护性抗原,可以诱导体液免疫和细胞免疫应答。所以,以Omp25和Omp31为包被抗原,建立一种血清学检测诊断方法具有重要的实际意义。在诊断布病的各种方法中,血清学检测因所需实验设备和环境要求更容易实现,在这方面相对于细菌学检测及分子生物学检测更具备优势。为建立布鲁氏菌病早期快速诊断的血清学方法,进一步加强布鲁氏菌病的防控,本研究首先构建原核表达载体,在大肠杆菌中表达纯化,获得重组表达的Omp25和Omp31蛋白。其次,建立了以Omp25和Omp31蛋白为包被抗原的间接ELISA方法。经验证,该方法检测结果与虎红平板实验检测结果符合率100%。然后利用该方法,检测了100份来自舒兰、农安、大安、通榆、德惠的未知羊血清,结果显示包被抗原为Omp25时100份血清中82份阳性,包被抗原为Omp31时100份血清中76份阳性。研究结果表明,重组表达的Omp25和Omp31具有良好的抗原性,检测所建立的间接ELISA方法具有良好的稳定性及灵敏性。此外,本研究采用BLI技术筛选了针对羊布鲁氏菌外膜蛋白Omp31蛋白的核酸适配体,为今后建立针对布病的适配体检测方法提供了新的思路。
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