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[目的]:研究大鼠脊髓全横断后损伤位点尾侧不同时相脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB蛋白的定位分布,及两因子mRNA的定量表达变化,并探讨BDNF对后肢运动功能的影响。
[方法]:54只健康成年雌性SD大鼠随机分为假手术组、脊髓全横断损伤1、3、7、14、28天组(9只/组),其中8只用于RT-PCR定量检测,1只用于免疫组织化学定性研究。实验组动物在脊髓T11节段横段脊髓;而假手术组动物行椎板切除术,不损伤脊髓。对实验组动物分别在不同的时相进行后肢运动功能的BBB评分。随后,分别取假手术和术后1、3、7、14天组损伤位点尾侧段脊髓组织用于RT-PCR对损伤位点尾侧脊髓BDNF及其受体TrkB的mRNA进行半定量分析(各时间点8例动物),并用免疫组织化学二步法确定BDNF及其受体TrkB蛋白的分布(各时间点1例动物)。
[结果]:①大鼠双后肢运动功能BBB评分显示:脊髓全横断后,大鼠双后肢运动功能的BBB评分在损伤1天评分为0,3天为0.38,然后逐渐升高,7天为1.09,14天为1.71,21天为2.44,28天达4.44。经统计学处理从术后3天至28天,大鼠后肢运动功能分别较前一时间点有所恢复,有统计学意义(P<0.05)。②RT-PCR显示:在损伤位点尾侧,BDNF mRNA的水平在术后各时间点较假手术组比较均无明显变化(P>0.05),而。TrkB mRNA的水平在术后1天、7天、14天均较假手术组明显增加(P<0.05)。③免疫组织化学染色结果显示:BDNF及其受体TrkB蛋白在脊髓上要分布于脊髓灰质神经元,腹角最明显。
[结论]:①脊髓全横断损伤后,大鼠后肢运动功能从3天至28天有部分恢复,提示脊髓全横断损伤后大鼠后肢运动功能呈现可塑性;②脊髓内源性BDNF表达未见明显增加,而其受体表达上调。提示脊髓损伤后,BDNF可能在后肢运动功能可塑性中发挥作用,但是其来源不是损伤位点自身,可能来自周围神经组织或骨骼肌组织。