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S-a-氰基-3-苯氧基苄醇(S-CPBA)是一种合成高效拟除虫菊酯杀虫剂的重要中间体,酶法拆分α-氰基-3-苯氧基苄醇乙酯(CPBAc)制备S-CPBA为一种非常有效的手段。
本研究以3-苯氧基苯甲醛(m-PBA)、过量的乙酰氯和氰化钠为原料,在冰浴条件下化学合成了底物CPBAc,用GC分析法对合成的CPBAc进行定量分析,其含量在95﹪以上,m-PBA含量为2.30﹪,并用GC-MS分析法对CPBAc、m-PBA进行了结构确认。
CPBA很不稳定,而CPBAc性质稳定,本研究针对CPBA和CPBAc的特性和多数酵母菌的生长有嗜酸性的特点确立了筛选目标为能产耐酸酯酶的酵母菌。从含油脂、拟除虫菊酯农药丰富的环境及适宜酵母菌生长的环境中采集微生物样品。依次进行酵母菌富集培养、以CPBAc的吐温-80溶液为唯一碳源富集培养、以CPBAc的乙醇溶液为唯一碳源富集培养,将经历了三轮富集培养的菌液涂抹到以CPBAc的吐温-80溶液为唯一碳源制作的平板上分离,初步挑选到了61株能利用CPBAc生长的菌株。复筛采取对初筛菌株逐一进行摇瓶发酵的方法,在pH<4.5条件下转化CPBAc,用手性HPLC定性分析,得到了两株优先立体选择性水解S-CPBAc的酵母菌菌株S11和S25。
经广东省微生物研究所鉴定,目的菌株S11和S25分别属于有孢汉逊酵母属和毕赤氏酵母属。