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白藜芦醇（Resveratrol,Res）作为一种来源广泛的天然多酚,具有丰富的生理功能和较强的生物活性,近年来其免疫活性机制的研究较为深入,通常作用于白细胞、腹腔巨噬细胞以及淋巴细胞等免疫细胞发挥免疫调节功能。目前,与免疫调节密切相关的多种信号转导通路的研究与机制的探讨已成为免疫学研究的重要组成部分。研究发现白藜芦醇可以作用于不同的组织器官,调节核转录因子-kappa B（Nuclear factor-kappa B,NF-κB）信号通路以及应激活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶（Stress-activated protein kinase/c-JunN-terminalkinase,SAPK/JNK）信号通路的表达,影响细胞的凋亡和机体炎症,而白藜芦醇调节机体免疫相关信号通路的研究却鲜有报道。因此本研究以腹腔注射环磷酰胺所致免疫抑制小鼠为模型,从器官水平（免疫器官脏器指数）,细胞水平（脾淋巴细胞增殖、T淋巴细胞亚群以及巨噬细胞吞噬）、分子水平（细胞因子）和信号通路水平（NF-kB、JNK信号通路）评价白藜芦醇的免疫调节作用及其作用机制,主要研究内容及结果如下:1.白藜芦醇对免疫抑制小鼠免疫功能的影响昆明种小鼠120只（雌雄各半）,随机分为6个组（n=20只/组）,空白对照组,环磷酰胺+生理盐水组,环磷酰胺+左旋咪唑30mg/kg/d（阳性对照组）,环磷酰胺+白藜芦醇高、中、低剂量组（60mg/kg/d、30mg/kg/d、15mg/kg/d）。除空白对照组外按照60mg/kg/d的剂量腹腔注射环磷酰胺,连续3d,空白对照组小鼠等量注射生理盐水。模型建立后各组小鼠按给药量连续灌胃给药7d,空白对照组小鼠等量灌胃生理盐水。7d后称量计算小鼠脾脏指数、胸腺指数以及肝脏指数;采用噻唑蓝（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况;采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群（CD3/CD4/CD8）;腹腔巨噬细胞吞噬功能实验检测小鼠廓清指数并计算其吞噬指数;采用酶联免疫法（ELISA）测定小鼠血清中细胞因子IL-1α/β、IL-2、TNF-α、NF-κB的表达。结果显示:①白藜芦醇高、中、低剂量组的脾脏指数与模型组比较均显著升高（P<0.05）,30mg/kg中剂量组效果最好;胸腺指数和肝脏指数有一定的上升趋势,差异无统计学意义（P>0.05）。②白藜芦醇高、中、低剂量组的脾淋巴细胞增殖率(A570)显著升高（P<0.05）,30mg/kg中剂量组效果最好,与脾脏指数结果相符。③白藜芦醇高、中、低剂量组CD4细胞百分比显著高于模型组（P<0.05）,CD3、CD8无显著差异（P>0.05）。④白藜芦醇高、中、低剂量组小鼠廓清指数较模型组均明显升高（P<0.05）;低剂量白藜芦醇组小鼠的吞噬指数较模型组显著升高（P<0.05）,高、中剂量组无显著差异（P>0.05）,小鼠吞噬指数与白藜芦醇呈浓度依耐关系,浓度越高,巨噬细胞吞噬指数越低。⑤ELISA结果显示,白藜芦醇各剂量组小鼠的血清IL-1α/α、IL-2、TNF-α以及NF-κB水平较模型组有显著升高。以上结果表明,白藜芦醇对免疫抑制小鼠的多项免疫指标均有一定的上调作用,对脾脏免疫功能的影响显著。2.白藜芦醇对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞NF-κB信号通路的影响为了进一步研究白藜芦醇作用于免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的作用机制是否与NF-κB信号通路相关,采用蛋白质免疫印迹法（Western blot,WB）检测小鼠脾淋巴细胞细胞核 NF-κB 以及细胞质 IκB kinases（IKK）、Inhibitor of NF-κB（IκB）的表达;采用免疫组化法检测小鼠脾淋巴细胞NF-κB的表达,验证Westernblot结果。结果显示:①白藜芦醇治疗组小鼠脾淋巴细胞NF-1κB、IKK的表达高于模型组,差异具有显著性（P<0.05）,IκB的表达与模型组相比有上升趋势,但差异不显著（P>0.05）。②脾脏NF-κB的染色主要定位于细胞核,白藜芦醇治疗组脾脏的NF-κB阳性密度显著高于模型组（P<0.05）,变化趋势与WB检测结果一致。结果表明,白藜芦醇能刺激免疫抑制小鼠脾淋巴细胞中NF-κB信号通路的表达,从而调控细胞核转录,调节IL-2等细胞因子的产生。3.白藜芦醇对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞JNK信号通路的影响为了进一步研究白藜芦醇对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞中NF-κB上游核转录因子c-jun所属JNK信号通路的影响,采用WB检测小鼠脾淋巴细胞细胞核c-jun以及细胞质SAPK/JNK的表达;采用免疫组化法检测小鼠脾脏c-jun的表达,验证WB结果。结果显示:①白藜芦醇治疗组脾淋巴细胞c-jun、SAPK/JNK的表达高于模型组,差异具有显著性（P<0.05）。②脾脏c-jun的染色主要定位于细胞核,60mg/kg白藜芦醇组脾脏c-jun的阳性密度显著高于模型组（P<0.05）,15mg/kg、30mg/kg白藜芦醇组脾脏c-jun的阳性密度有一定的上升趋势,无显著差异（P>0.05）,变化趋势与WB检测结果一致。结果表明,白藜芦醇能刺激免疫抑制小鼠脾淋巴细胞中JNK信号通路的表达,调控JNK/NF-κB信号级联通路的表达。综上所述,白藜芦醇可通过影响免疫器官脏器指数、脾淋巴细胞增殖率、T淋巴细胞亚群、腹腔巨噬细胞吞噬指数、血清细胞因子等指标,调节免疫抑制小鼠的免疫功能,其中对脾脏的免疫功能影响显著。在此基础上,采用蛋白质免疫印迹以及免疫组化的手段,评价了白藜芦醇对脾淋巴细胞NF-κB信号通路和JNK信号通路的影响,结果显示,白藜芦醇对免疫抑制状态的免疫调节作用机制可能是通过活化脾淋巴细胞中IKK的表达从而诱导JNK/NF-κB信号级联通路的表达实现的。