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白血病是世界范围内常见的血液系统恶性肿瘤。它是人体造血系统的一种恶性疾病。也是我国十大高发恶性肿瘤之一。目前,化疗是急性白血病的主要治疗手段,也是其它治疗的基础。Lycorine(石蒜碱)是从我国广泛分布的多年生草本植物石蒜中分离出的一种化学单体,属于异喹啉类生物碱,具有明显的抗白血病的作用。笔者所在课题组对lycorine抗白血病机制进行了系统的研究,已取得了系列研究结果。本实验室所使用的实验材料为人急性早幼粒白血病细胞株HL-60和人慢性粒细胞白血病细胞株K562,通过研究lycorine作用白血病细胞株后细胞周期相关蛋白表达的变化,进一步深入阐明lycorine抑制白血病细胞增殖的分子机制。本课题用不同浓度的lycorine作用HL-60细胞24h后,采用real-time PCR,检测p21的基因表达,发现lycorine能够在基因水平呈浓度梯度相关性上调p21的表达；另外,用不同浓度的lycorine处理K562细胞24h后提取总蛋白,通过Western blotting分析p21的表达,结果表明,随着药物浓度的增大,p21表达也明显上调。此结果提示p21是lycorine作用白血病细胞周期的关键上游靶分子。进而,笔者采用Western blotting在蛋白质水平检测了lycorine作用后细胞周期进程中G1和G2/M期中受p21直接调控的CDK/Cyclin表达变化及在G1/S期进程中发挥重要调控点作用的非磷酸化Rb蛋白的表达变化。结果表明,随着lycorine作用浓度的逐渐增大,HL-60细胞中CDK2、CDK1、CyclinB蛋白表达量下调,非磷酸化Rb的蛋白表达量上调；K562细胞中CDK1、CyclinB、CyclinE蛋白表达量下调。同时,利用流式细胞仪,笔者定量分析了不同浓度lycorine作用HL-60细胞后CDK2、Cyclin B、CDK1、CyclinE、非磷酸化Rb蛋白分子的平均荧光强度,检测结果发现CDK2、CDK1、Cyclin B、CyclinE蛋白分子的平均荧光强度随着lycorine浓度的增大而呈剂量依赖性减少；非磷酸化Rb蛋白分子则随着lycorine浓度的增大而表达上调。综上所述,lycorine能够在基因及蛋白水平明显上调p21的表达；并且通过上调p21进而明显降低细胞周期蛋白CDK2、Cyclin E、CDK1、Cyclin B的表达；上调非磷酸化Rb的蛋白表达,从而使白血病细胞周期发生阻滞。