【摘 要】
：
背景：肿瘤转移,尤其是远隔组织器官的转移是导致乳腺癌患者死亡的最主要原因。在肿瘤细胞迁移过程中,细胞骨架重构是肿瘤细胞侵袭性行为的基础,肌动蛋白纤维动态性的重构为肿瘤细胞的迁移提供了所需的动力,由它所形成的板状伪足和线状伪足也是肿瘤细胞运动的结构基础。VASP参与细胞骨架的重排过程,在恶性肿瘤的发生及进展过程中发挥着重要作用,文献报道及本课题组研究均发现VASP在恶性肿瘤的转移过程中扮演者重要角色
论文部分内容阅读
背景：肿瘤转移,尤其是远隔组织器官的转移是导致乳腺癌患者死亡的最主要原因。在肿瘤细胞迁移过程中,细胞骨架重构是肿瘤细胞侵袭性行为的基础,肌动蛋白纤维动态性的重构为肿瘤细胞的迁移提供了所需的动力,由它所形成的板状伪足和线状伪足也是肿瘤细胞运动的结构基础。VASP参与细胞骨架的重排过程,在恶性肿瘤的发生及进展过程中发挥着重要作用,文献报道及本课题组研究均发现VASP在恶性肿瘤的转移过程中扮演者重要角色,但目前的研究仍不能全面阐释乳腺癌组织中VASP异常表达的分子机制,也尚未建立一个以VASP为核心的调控网络,VASP在乳腺癌细胞迁移中的作用及其调控机制尚需进一步的探索。目的：阐明VASP在乳腺癌细胞迁移中的作用及其异常表达的调控机制,构建以VASP为核心的CREB/Lin28/miR-638/VASP调控网络,全面阐释VASP及其调控网络在乳腺癌发生发展中的作用及机制,为拓展乳腺癌临床治疗新途径提供理论基础。方法：1.构建VASP特异性敲降的乳腺癌稳转细胞系,检测细胞内肌动蛋白纤维形态、细胞增殖、细胞迁移能力的改变,并在荷瘤裸鼠模型中加以验证,探讨VASP在乳腺癌细胞增殖和迁移中的作用；2.探究CREB1在转录水平、hsa-miR-638在转录后水平调控VASP表达的作用机制,构建以VASP为核心的调控网络,阐释VASP在乳腺癌中异常表达的可能机制;3.从Lin28蛋白抑制hsa-miR-638加工成熟的角度探讨hsa-miR-638在乳腺癌细胞中表达水平下调的可能机制,完善CREB/Lin28/miR-638/VASP调控网络。结果：1.基因芯片数据发现VASP、CREB1、Lin28在乳腺癌组织及细胞中的表达水平均高于正常组织及细胞。2.敲降VASP后乳腺癌细胞的肌动蛋白纤维丝形态改变明显,规则性消失,无序卷曲、聚集,变短,且乳腺癌细胞的迁移能力显著下降；在荷瘤裸鼠模型中,敲降VASP后乳腺癌细胞转移能力显著降低；3. CREB1在乳腺癌组织中的表达水平显著高于其对应的癌旁组织,在乳腺癌细胞系中表达水平高于正常乳腺细胞；4. Luciferase Assay及ChIP实验显示CREB1可以通过结合VASP启动子区的CRE位点,在转录水平激活VASP的表达,敲降CREB1后VASP的蛋白及mRNA水平显著降低；5. hsa-miR-638可以通过结合VASP 3’UTR区的“种子”序列,在转录后水平抑制VASP蛋白的表达,抑制乳腺癌细胞的迁移；6. CREB1可以通过结合Lin28A和Lin28B启动子区域的CRE位点,在转录水平激活Lin28A和Lin28B的表达；敲降CREB1后Lin28A和Lin28B的mRNA水平显著降低；7.Lin28可以通过结合hsa-miR-638茎环区的"GGAG"序列,影响hsa-miR-638的加工成熟过程,下调miR-638成熟体的水平,从而上调VASP的蛋白水平,促进乳腺癌细胞迁移；8.TUT4可能参与Lin28A介导的pre-miR-638的降解过程。结论：本研究发现乳腺癌细胞中存在EGF/CREB 1/Lin28/miR-638/VASP调控网络,EGF一方面可以通过上调CREB1的磷酸化水平,进而提高VASP以及Lin28A和Lin28B的转录水平;另一方面还可以促进Lin28介导的pre-miR-638的降解,下调miR-638成熟体的表达水平,解除miR-638对VASP转录后水平的抑制,进一步促进VASP蛋白的表达；VASP的异常高表达会增强乳腺癌细胞的迁移能力,进而提高乳腺癌患者远端转移的几率,缩短患者的生存期。本研究试图全面阐释VASP及其调控网络在乳腺癌侵袭转移过程中的作用及机制,为拓展乳腺癌临床治疗新途径提供理论基础。
其他文献
近年,新型多功能复合材料的构建及其结构与性能之间的构效关系已引起广泛关注,并成为材料研究领域的热点。复合材料的独特优势在于它可以发挥各个组分的结构和性能特点,提供单一组分的材料难以具备的性能,从而拓宽材料应用范围,因此广泛应用于生物医用、新能源和环境保护等领域。面对不可再生化石资源的日益消耗以及非降解塑料引起的环境污染日益严重,可再生生物质资源展现出巨大的应用前景,尤其是基于天然高分子的研究与开发
作为法国当代最著名,被译介最广泛的作家之一,米歇尔·韦勒别克可谓是文坛学界中的奇树异草。作家初心根植于诗歌,并矢志不渝地将诗性播种至小说创作中,才思蔓延到文艺各个领域:散文,电影,摄影,音乐制作等等。作者属后起之秀,90年代崭露头角,二十年后摘得龚古尔奖桂冠正式加冕于文学殿堂。时至今日,韦氏每部小说的发表几乎都引致毁誉交加,臧否两级。作家及其作品带来的争议发人深思。韦氏本为理工科出身,其文脉,曙光
DNA去甲基化在Epstein-Barr virus （EBV）潜伏感染激活到裂解感染过程中起到至关重要的作用。但是,对于细胞如何响应外界刺激应答而起始表观遗传修饰的改变（特别是DNA去甲基化）,到目前为止还不是很清楚。我们的研究发现,Erk/c-Jun信号通路是佛波酯（TPA）诱导EB病毒立即早期基因Zta启动子DNA主动去甲基化所必需的。Erk信号通路特异性抑制剂U0126可以显著抑制TPA诱
目的：（1）正黏液病毒的基质蛋白（matrix, M）在病毒生命周期的每个阶段都发挥重要作用,尤其是病毒的组装与脱壳过程。根据流感病毒基质蛋白结构和功能的相关研究,得出了细胞内环境pH值变化影响基质蛋白构象转变,从而完成基质层聚合和解离的分子机制。为了进一步在索戈托病毒（Thogoto virus, THOV）中验证此机制,本文尝试通过结构生物学的研究方法,即获得索戈托病毒基质蛋白的晶体并解析其结
Prion疾病,又被称为传染性海绵状脑病（TSEs）,作为一种重要的致死型神经退行性疾病,广泛存在于各种哺乳动物体内特别是人体内,包括羊瘙痒病、疯牛病,人的家族性和散发性的CJD、GSS综合症、FI以及kuru病等。如今prion疾病已经扩展为prion-like疾病,包括由α-突触核蛋白导致的帕金森疾病,由tau蛋白和Aβ导致的阿尔兹海默病,由TDP-43以及S○D1导致的肌萎缩性脊髓侧索硬化症
非贯通节理岩体为边坡和地下洞室工程中经常遭遇的一类复杂的工程介质,节理的存在及其相互影响对岩体的破坏和力学特性起着决定性的作用。本文采用水泥砂浆作为相似材料模拟砂岩,制作包含多条非贯通节理的岩体试件,开展了一系列的单轴、双轴及三轴压缩试验。同时,在试验过程中采用多通道声发射检测仪对试件的破坏过程进行了动态监测。通过物理试验、理论分析及数值模拟试验对包含多条节理岩体试件的变形和力学特性、破坏模式、分
非监督变化检测是通过遥感影像获取地表变化信息的重要手段,因无需参考数据,有着广阔的应用前景。但由于遥感数据本身的质量问题,如异物同谱、同物异谱、噪声、混合像元和模糊边界等；以及变化检测算法的局限性,使得不确定性总是伴随着非监督变化检测的整个过程,影响了最终的变化检测精度。为此,本论文对现有非监督变化检测算法的不确定性进行深入分析,从生成差分影像和分析差分影像两个关键步骤入手,借助于模糊集合、模糊拓
褐飞虱（Nilaparvata lugens Stal.,BPH）是水稻（Oryza sativa L.）的专食性害虫。在褐飞虱与水稻长期的攻击与反击的竞争过程中,二者形成了一种协同进化关系。水稻为了抵御褐飞虱的取食而进化出抗虫性,而褐飞虱则产生新的生物型来克服水稻抗性,水稻反过来又产生出新的抗性形式来对抗新的褐飞虱生物型。阐明水稻抗褐飞虱基因形成与进化的机制和水稻抗虫反应的分子机理,对于褐飞虱这
车联网（vehicular ad hoc network,VANET）中高效快速的数据传输对于提高道路安全性和交通效率至关重要。由于车辆高移动性和快速的拓扑变化,导致基于传统专用短程通信（dedicated short ranged communication,DSRC）的车辆与基础设施间（vehicle to infrastructure,V2I）或者车辆间（vehicle to vehicle
第一部分七氟醚吸入麻醉对急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏的影响目的:探讨七氟醚吸入麻醉是否加重急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏,及其痛觉过敏的程度。方法:选取10月龄大小雄性SPF级健康Sprague-Dawley大鼠共76只,每只体重约为300g,采用随机数字表法分为4组（n=19）:睡眠剥夺组（SD组）,大鼠于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺;七氟醚吸入麻醉组（SEV组）,大鼠放置入SD