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脆性X综合征（Fragile X syndrome,FXS）是一种常见的遗传性智力低下性疾病，它是由致病基因 FMR1编码产物 FMRP的表达缺失或下降所引起。FXR1(Fragile X related gene1，脆性X相关基因1)与 FMR1属于同一个基因家族，是一种对于神经、肌肉系统发育有重要调控作用的管家基因，其编码产物FXR1P类似FMRP具有mRNA结合功能与蛋白质结合功能等，FXR1P系列相互作用蛋白的筛选以及验证将在一定程度上有助于了解FXR1P的调节机制及其基本功能，进而明确FXR1P与脆性X综合征发病机制的关系。 目的：应用免疫共沉淀方法进一步验证 FXR1P和本实验室筛选的候选结合蛋白FTH1及CMAS的相互作用关系，并通过激光共聚焦显微镜对FXR1P和FTH1及CMAS进行细胞内共定位，从而确定FXR1P和结合蛋白的相互作用，为探讨FXR1P的功能及其与脆性X综合征的发病机制的关系提供实验基础。 方法：构建三个真核表达载体 pCMV-HA-FXR1、pCMV-Myc-FTH1和pCMV-Myc-CMAS，利用免疫共沉淀技术验证FXR1P与FTH1及CMAS之间的相互作用。其次，构建表达FXR1基因的增强型绿色荧光融合蛋白表达载体和表达FTH1及CMAS蛋白的红色荧光融合表达载体，分别共转染HEK293T细胞和HeLa细胞，在激光共聚焦显微镜下观察 EGFP-FXR1与 RFP-FTH1及RFP-CMAS在细胞中的表达和共定位现象。 结果：成功构建了pCMV-HA-FXR1、pCMV-Myc-FTH1、pCMV-Myc-CMAS、pEGFP-C1-FXR1、pDsRed1-Monomer-C1-FTH1、pDsRed1-Monomer-C1-CMAS六种融合质粒；Western blot法证实转染的HEK293T细胞能正确表达HA-FXR1融合蛋白、Myc-FTH1融合蛋白和Myc-CMAS融合蛋白。免疫共沉淀结果显示，FXR1P蛋白可以在Myc抗体的免疫沉淀物中检测出来，同样在抗HA抗体的免疫沉淀物中也能分别检测到蛋白FTH1和CMAS。激光共聚焦的结果显示，FXR1P与FTH1及CMAS在空间分布上分别存在相互作用，且FXR1P与FTH1在胞浆处存在共定位现象，FXR1P与CMAS在胞浆和胞核均存在共定位现象。 结论：1、免疫共沉淀和细胞内共定位实验证实 FXR1P与 FTH1存在相互作用，两者在胞浆存在共定位。2、免疫共沉淀和细胞内共定位实验证实FXR1P与CMAS存在相互作用，两者在胞浆和胞核均存在共定位，且FXR1P使 CMAS表达从胞核向胞浆迁移。