负载生长因子和左氧氟沙星的海藻酸钠/聚乙烯醇复合膜的结构特征及体外释放性能研究

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1.目的:  以海藻酸钠(SA)、聚乙烯醇(PVA)为主要材料,制备同时负载碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及左氧氟沙星(LVFX)的SA/PVA复合膜,研究作为缓释复合药物载体的角膜接触镜材料的可行性。  2.方法:  将SA和PVA按1∶2,1∶1,2∶1,4∶1的质量比混合,同时加入0.1mL浓度为0.1mg/mL的bFGF溶液及1mL浓度为10mg/mL的左氧氟沙星溶液,以溶液浇铸法制备不同质量比的负载有bFGF和LVFX的SA/PVA复合膜、单纯负载LVFX的SA/PVA复合膜及未载药的SA/PVA复合膜。将不同质量比的未载药复合膜与40mg/mL的氯化钙溶液交联,交联及未交联复合膜放置在去离子水、PBS缓冲液及人工泪液中,观察其溶胀性;利用扫描电镜放大4000倍,观察不同质量比复合膜的表面及横断面的组织结构形态;使用紫外可见光分光光度计测量载药及未载药不同质量比复合膜的透光率,通过以上各项检查来评价其结构特征。钻取直径为10mm的复合膜,同时与50mg/mL氯化钙溶液交联,随后进行体外释放试验,以紫外分光光度法测样品中的左氧氟沙星浓度,以双抗体夹心ABC-ELISA法测定其中bFGF的浓度,以评价其是否存在缓释效果。  3.结果:  未交联的复合膜稳定性较差,在去离子水、PBS缓冲液及人工泪液中2h内溶解。交联后的复合膜具有较强的稳定性,在去离子水及人工泪液中可保持其形状,未见明显溶胀现象。而在PBS缓冲液中交联后的SA/PVA复合膜同样存在溶胀、溶解现象,SA比例越低,溶解速率越快,并且在4h内完全溶解。  不同质量比的SA/PVA复合膜都具有相对光滑的表面及均一的微观结构,均有孔洞结构。当质量比SA∶ PVA=0.5时,复合膜表面最为光滑,结构最为规整,孔洞细致,形似蜂窝状。  无载药SA/PVA复合膜具有良好的透光率,在可见光谱及紫外光谱有45%以上的透光率。负载有左氧氟沙星的复合膜对紫外光具有较强的吸收作用,几乎可以完全滤过紫外光。在可见光谱中,负载有药物的复合膜透光率均低于无载药的复合膜。SA的含量对复合膜在可见光谱部分的透光率影响较大,质量比SA∶PVA=0.5的复合膜透光率最大,最高接近90%,质量比SA∶ PVA=4的复合膜透光率最低,最低接近40%。  质量比不同的载药SA/PVA复合膜在前3个小时左氧氟沙星均有突释现象,随着时间的推移逐渐变得平缓,72小时后,左氧氟沙星的浓度依然在0.05ug/mL以上,按泪液体积10μL计算,换算成眼表药物浓度,72小时后的药物浓度高于2ug/mL,大部分时间点的药物浓度均达到眼部常见感染病原菌的MIC90。bFGF的释放无突释现象,经过72小时的释放,bFGF的浓度保持在5pg/mL以上,按泪液体积10μL计算,换算成眼表药物浓度,最低bFGF浓度达2ng/mL,但大多数时间点的bFGF浓度达6ng/mL以上,最高可达14ng/mL,达到体外促进角膜上皮增殖的有效浓度。  4.结论:  当质量比SA∶ PVA=0.5时,具有最光滑的表面,结构最为规整,孔洞细致,形似蜂窝状。该比例复合膜在可见光区具有较强的透光性,同时可几乎完全吸收紫外线。SA/PVA复合膜具有良好的缓释效果,释放左氧氟沙星浓度可以达到眼部感染常见病菌的MIC90,释放bFGF浓度达到体外促进角膜上皮增殖的有效浓度,该复合膜有望作为缓释复合药物载体的角膜接触镜材料。
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