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目的本论文旨在探究核受体辅活化蛋白7（Nuclear receptor co-activator 7,NCOA7）在肺癌细胞中的抗氧化机制,为肺癌的治疗及其耐药性的研究提供一种新的思路。方法1.采用慢病毒表达系统NCOA7 shRNA在非小细胞肺癌A549细胞中敲低NCOA7,构建A549-shNCOA7细胞株。同时在A549-shNCOA7细胞株中恢复表达NCOA7野生型（NCOA7-WT）或其突变体（N775,L522A/I523A,Del N105）。NCOA7的敲低和表达效果采用免疫印迹法检测。2.采用细胞计数法检测NCOA7敲低细胞株（A549-shNCOA7）和对照细胞株（A549-shLUC）在有无H2O2处理条件下的细胞增殖水平。3.采用划痕和小室迁移分析法检测A549-shNCOA7和A549-shLUC细胞株以及NCOA7-WT或其突变体恢复表达细胞株在有无H2O2处理条件下的细胞迁移能力。4.用光学显微镜观察A549-shNCOA7和A549-shLUC细胞株以及NCOA7-WT或其突变体恢复表达细胞株在有无H2O2处理条件下的细胞形态变化。5.通过免疫荧光染色法检测A549-shNCOA7和A549-shLUC细胞株以及NCOA7-WT或其突变体恢复表达细胞株在有无H2O2处理条件下其细胞黏着斑及肌动蛋白纤维的形成情况。6.通过GST-ERbd pulldown实验检测NCOA7的核受体结合结构域（ERbd）及其失活突变体（NCOA7-L522A/I523A）与细胞内雌激素受体（ER）的相互作用。7.采用蛋白质免疫共沉淀法检测NCOA7-WT及NCOA7-L522A/I523A在H2O2处理条件下与单氧化酶MICAL1的相互作用情况。8.利用免疫荧光染色法检测NCOA7-WT及NCOA7-L522A/I523A分别与MICAL1-WT及其突变体在细胞内的定位情况。结果1.敲低NCOA7显著抑制肺癌A549细胞的迁移,但对细胞的增殖无显著影响。2.H2O2处理抑制A549细胞增殖和迁移;敲低NCOA7后,H2O2处理引起A549细胞贴壁减弱,细胞收缩变圆,细胞增殖显著减慢,细胞迁移的抑制程度大幅增加。3.H2O2处理A549-shNCOA7细胞导致其黏着斑减少90%以上,肌动蛋白纤维明显解聚。4.在A549-shNCOA7细胞中恢复表达NCOA7-WT和羧基端剪切突变体NCOA7-N775消除了H2O2引起的细胞贴壁减弱、肌动蛋白纤维解聚、细胞内黏着斑减少以及对迁移的抑制效应,而表达氨基端剪切突变体NCOA7-DelN105仅能部分消除H2O2的效应,但表达核受体结合缺陷突变体NCOA7-L522A/I523A则对H2O2的效应没有影响。5.NCOA7-WT与单氧化酶MICAL1相互作用并在细胞质内共定位;过表达MICAL1促使NCOA7转运至细胞核,且该作用需要MICAL1的单氧化酶活性。结论1.NCOA7通过抵抗H2O2引起的细胞骨架和黏着斑的损害而促进肺癌细胞增殖和迁移。2.NCOA7的核受体结合结构域（ERbd）具有抗氧化功能,且其核转位有利于发挥抗氧化作用。3.NCOA7与单氧化酶MICAL1相互作用,且被具有氧化酶活性的MICAL1诱导入核,该过程不依赖于NCOA7的核受体结合位点。