固态发酵法制备苦荞抗菌肽及其在罗非鱼片保鲜中的应用

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:WatsonWen
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抗菌肽是生物体为抵抗外界病原菌感染而在体内产生的一种免疫多肽,可以从各种各样的动物、植物、微生物中分离得到。抗菌肽具有分子量小,抗菌性强、抗菌谱广,热稳定性好,水溶性好,不易产生耐药性,安全无毒等优点越来越受到消费者青睐。本论文主要进行固态发酵法制备苦荞抗菌肽菌株的筛选及发酵工艺条件的优化,并在此基础上研究苦荞抗菌肽对罗非鱼片的保鲜效果。为苦荞的应用研究提供新方向,为抗菌肽的制备及其大规模生产提供理论依据和技术支持,同时为抗菌肽应用于水产品保鲜提供一定参考。主要研究内容和结果如下:1.苦荞固态发酵菌株的筛选采用米曲霉、酱油曲霉、雅致放射毛霉、少孢根霉分别对苦荞进行固态发酵,以蛋白酶活力、水解度、多肽含量、抑菌活性为筛菌指标,筛选出米曲霉为固态发酵制备苦荞抗菌肽的最适菌株。米曲霉固态发酵10g苦荞2d时产物液多肽含量最高为19.26±0.55 mg/mL,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别为96.62±1.66%和97.06±0.49%。对米曲霉发酵2d产物液的不同分子量分布及活性分析表明分子量大小对苦荞抗菌肽的活性有一定影响。2.固态发酵制备苦荞抗菌肽工艺条件的优化在单因素试验的基础上,利用Plackett-Burman试验和响应面试验优化出米曲霉固态发酵10 g苦荞制备苦荞抗菌肽的最佳工艺条件。最佳工艺条件为:接种量为1.97 mL,加水量为4.06 mL,磷酸氢二钾添加量为0.34%,发酵时间为2.17d,多肽含量理论值可达39.62 mg/mL,实际测定值为39.18±1.11 mg/mL,且此时对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别为98.39±0.57%和98.55±0.75%。3.苦荞抗菌肽对罗非鱼片的保鲜效果采用不同浓度的苦荞抗菌肽对罗非鱼片进行保鲜处理,4℃条件下贮藏,以罗非鱼片的感官变化、pH值、硫代巴比妥酸(TBA)、挥发性盐基氮(TVB-N)及菌落总数作为鲜度评价指标。6.0 mg/mL的苦荞抗菌肽处理过的罗非鱼片保鲜期延长了4天,保鲜时间是对照组的2倍,且保鲜效果显著优于10 mg/mL的乳酸链球菌素。
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