抑制胰岛移植物TF的表达对体内IBMIR动物模型影响的急性研究

• 作 者: 梁琪
• 机 构: 中南大学
• 出 处: 中南大学
• 发表日期: 2011年期
• 关键词: 胰岛细胞移植 IBMIR 反义RNA TF SCID鼠

目的：在临床胰岛移植中,注入门静脉的胰岛与血液接触,立即发生一种凝血/炎症反应过程,我们称之为立即经血液介导的炎症反应(IBMIR),IBMIR是胰岛植入后的最早损伤,将导致绝大多数移植物的丢失和功能损伤,是造成胰岛移植早期细胞损伤最重要的原因,而胰岛细胞表面的组织因子(tissue factor,TF)是激发IBMIR凝血反应的始动因子。本实验通过反义RNA技术,干扰组织因子(TF)在猪胰岛细胞的表达,对胰岛进行预处理,并建立体内IBMIR模型,观察抑制TF表达后的胰岛细胞对移植后IBMIR发生程度的影响。方法：采用反义RNA技术,运用实时定量RT-PCR方法筛选出对TF沉默效果最佳反义RNA,转染新生猪胰岛细胞。建立猪胰岛细胞经门静脉移植于SCID小鼠的异种IBMIR体内模型,将沉默TF表达后的新生猪胰岛细胞在IBMIR体内模型中各项指标(血糖、C肽、TAT)进行检测,并取肝脏组织作病理学检测,从而观察IBMIR发生程度。结果：经RT-PCR方法检测oligoTF-1006对胰岛细胞TF沉默效果最佳,其抑制效果在转染后第四天最好。将沉默TF表达后的猪胰岛细胞经门静脉移植于SCID小鼠后,其1小时内血糖降低程度、C肽值变化、血清TAT值及胰岛细胞周围血栓形成均显示其IBMIR的发生程度较对照组、空白转染组明显减轻。结论：TF作为IBMIR的启动因子,反义RNA能显著抑制胰岛细胞中TF的表达,将沉默TF表达的猪胰岛细胞经门静脉移植于SCID鼠,能够减少胰岛移植初期的凝血激活及血小板活化,减轻胰岛细胞移植后IBMIR的发生程度,有望在将来应用在临床上减少移植物的丢失,提高移植后胰岛存活率。