【摘 要】
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AS160是一种GTPase激活蛋白，它通过抑制GTP结合蛋白活性调节许多细胞内囊泡的运输。在肌肉和脂肪细胞中，AS160可调控胰岛素信号通路中葡萄糖转运体4(GLUT4)的转运，从而调节肌肉
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AS160是一种GTPase激活蛋白，它通过抑制GTP结合蛋白活性调节许多细胞内囊泡的运输。在肌肉和脂肪细胞中，AS160可调控胰岛素信号通路中葡萄糖转运体4(GLUT4)的转运，从而调节肌肉及脂肪组织的糖摄取。AS160还参与脂滴的积累与融合，以及调节心脏R-波的振幅。近年来也有文献报道了AS160在胰岛β细胞中的功能，在胰岛β原代细胞及体外培养的MIN6B1细胞中下调AS160表达后，葡萄糖诱导的β细胞增殖缓慢，同时引起细胞凋亡。然而AS160在细胞增殖过程中的具体作用机制并不清楚。 在本研究中，我们通过稳定干扰及瞬时干扰AS160表达的方式，在多种细胞中检测了AS160对细胞增殖的影响。实验结果表明，当AS160蛋白表达下调时，细胞增殖速度明显降低。进一步分析细胞周期及凋亡发现，AS160蛋白量减少后引起细胞周期G1期阻滞，但未导致明显的细胞凋亡。而干扰AS160蛋白表达后引起的周期阻滞及增殖缓慢都不依赖于其对葡萄糖摄取的调节。随后通过QPCR检测CKI的mRNA水平，其中p15、p18及p21的mRNA表达量明显上升。我们进一步在蛋白水平上做了分析，结果显示在多种细胞中AS160负调控p21蛋白的表达并且该过程不依赖p53及TGFβ信号通路。我们通过干扰及过表达AS160的方式反复验证了AS160与p21间的关系。此外，干扰p21的表达可以恢复由AS160下调引起的细胞周期阻滞及增殖缓慢。 综上所述，在多个种类的细胞中都可以检测到AS160对细胞周期的调节及细胞增殖的影响，具有普遍的生物学意义。AS160通过负调控p21表达的方式调节细胞周期，从而影响细胞增殖。而且这一过程不依赖于AS160所调节的葡萄糖摄取。因此本研究的结果进一步拓展了对AS160生物学功能的认识。
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