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目的：研究发现杂色曲霉素(Sterigmatocystin,ST)作为继黄曲霉毒素之后的第二大真菌毒素，广泛存在于自然界中，可污染多种粮食作物，在ST污染严重的地区，居民患有胃癌和肝癌的机率高于其他地区。而乙醇的摄入在近些年来也逐渐增加，长期大量的饮酒可诱发多种疾病，尤其是肝损害。在日常生活中，人们可能同时摄入两种物质，我们猜想是否有毒物质的联合摄入比单一摄入对身体健康伤害更大。因此，本实验以体外实验为研究手段，探究乙醇和ST的联合处理是否可增加这2种毒物肝损伤程度；并从氧化应激和溶酶体膜稳定性两个方面来探讨其DNA损伤的机制。方法：实验体系选定人肝细胞Hep G2，实验步骤如下：1.采用MTT细胞存活率实验，确定染毒剂量；金正均法计算合并效应相关系数，确定两者相互作用关系。2.采用单细胞凝胶电泳（SCGE）实验检测Hep G2细胞DNA的损伤状况；用Hoechst33258染色检验细胞凋亡。3.采用2’，7’―二氢二氯荧光素（DCFH）染色法检测Hep G2细胞中ROS的水平。4.荧光色素吖啶橙（Acridineorange，AO）染色法测定Hep G2细胞内溶酶体膜的稳定性。5.应用SPSSv11.5统计软件包对实验结果进行统计分析。结果：1. MTT实验结果显示ST的IC50为10.1μg/mL，乙醇的IC50为1190.4μg/mL。乙醇240μg/mL和ST1μg/mL联合作用处理HepG2细胞24h后，联合系数为q=0.99，呈单纯相加作用。2. Hep G2细胞在ST0.5、1和2μg/mL分别处理0.5、1和2h，乙醇60、120和240μg/mL分别处理1h后引起DNA断裂，细胞出现彗星样的拖尾，尾长的增长同对照组相比呈剂量依赖关系，并具有统计学意义。联合处理0.5h后Hep G2细胞开始出现DNA损伤。ST和乙醇联合作用2h处理后，细胞损伤程度加剧且细胞凋亡的数量大于10%。3.ST、乙醇单独处理Hep G2细胞0.5h后可引起ROS生成量增加，联合处理组ROS的生成量与单独乙醇处理组相比增加。4.Hep G2细胞在ST单独处理1h或乙醇处理0.5h后，溶酶体膜稳定性开始发生变化。在不同剂量乙醇中联合使用1μg/mL ST染毒1h，可测得的细胞AO荧光强度达到顶峰，2h联合染毒处理组时发生回落，总体较乙醇单独染毒处理组有显著性差异。结论：与乙醇单独作用相比，杂色曲霉素和乙醇的混合处理会降低细胞存活率，增加Hep G2细胞DNA链断裂程度，加剧DNA损伤。其作用机制可能是乙醇和ST联合作用均可造成细胞损伤且其损伤一部分原因与溶酶体途径以及氧化应激途径有关。ST和乙醇联合处理可引起细胞内ROS的和AO荧光值强度的增加，且增加量与时间和剂量有一定的依赖关系。联合染毒处理2h后，细胞损伤继续加剧，与乙醇单独处理组相比，ROS生成量和AO荧光强度没有显著增加，AO荧光强度反而比乙醇单独作用减少，可能与凋亡细胞增多有关，这在彗星实验中也得到验证。因此ST和乙醇联合处理Hep G2细胞诱发DNA损伤加剧的原因可能一部分来自于氧化应激作用，一部分来自与溶酶体破裂对细胞DNA的直接损伤作用。