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目的：全球乳腺癌发病率自20世纪70年代末开始逐渐上升，并体现出年轻化趋势，它是威胁女性身心健康的常见肿瘤，是致使女性死亡的重要因素。目前虽然开发了很多化疗药物，医疗水平也逐渐提高，对人类做出了重大贡献，但也只有少数的病人能够得到有效的治疗，绝大多数乳腺癌恶化、复发的现象仍不可避免。很多科学家认为―肿瘤起源于肿瘤干细胞‖，肿瘤干细胞是指具有干细胞性质的肿瘤细胞，也就是具有自我更新、高致癌性、多细胞分化等能力。癌干细胞存在于癌细胞中，是癌症复发和转移的"元凶"，拥有重建肿瘤组织和放化疗抵抗的能力，导致肿瘤治疗失败，从而发生肿瘤复发和转移。所以研究出针对乳腺癌干细胞的疗法，能够专一性的杀死癌症干细胞，以降低肿瘤产生抗药性或转移的现象，对人类将有重要意义。随着对乳腺癌干细胞的深入研究，人们已经能够根据乳腺癌干细胞表面的分子标志物的表达如 PROCR，ABCG2， ALDH1等，用流式分选术将其分选出来，并发现它们在无血清低吸附培养条件下能够形成乳腺微球，富集乳腺癌干细胞。斑马鱼的基因序列识别显示与82％的人类疾病具有同源性，是近年来一个通用的研究癌症的模型。它具有胚胎多易得到成本低，能充分模拟肿瘤细胞侵入血管，随着血流发生远距离转移能力等优点，为高通量筛选药物提供了良好的异体移植模型。 方法：以乳腺癌细胞系微球培养和斑马鱼异体移植为研究模型，筛选对象来自美国药品收集库，包含1280种 FDA认证的药物，所有的药物以10 mM浓度溶解在DMSO里。本实验分三个部分筛选抑制乳腺癌干细胞的药物。建立筛选药物的模型，用已知对乳腺癌癌干细胞有抑制作用的盐霉素作阳性药物，选取分别代表 ER-PR-Her2-，ER+PR+Her2-，ER-PR-Her2+的MDA-MB-231，MCF-7，SKBR3细胞系进行乳腺微球培养和斑马鱼显微注射，每个细胞系分两组：实验组和对照组。微球培养实验里盐霉素暴露于无血清的细胞培养液，斑马鱼显微注射实验里盐霉素暴露于胚胎培养液。体外初筛实验，以10μM的浓度筛选出能明显抑制 MDA-MB-231， MCF-7， SKBR3细胞系乳腺微球形成的药物，筛选出的药物再做后续实验。斑马鱼显微注射实验，三种乳腺癌细胞系分别用癌干细胞标志物 PROCR， ABCG2，ALDH1通过流式分选技术分选出癌干细胞，标记荧光示踪染料 CM-DIL后显微注射到48 hpf的斑马鱼卵黄周里，注射24 h后用荧光显微镜拍照并暴露药物，注射72 h再拍照，到注射96 h观察癌干细胞转移情况。 结果：盐霉素作为阳性药物抑制了乳腺癌干细胞的微球形成、生长和转移，验证了药物筛选模型的可行性。体外实验从1280种药里筛选出163(12.7%)种明显抑制微球形成的药物，三个细胞系 MDA-MB-231，MCF-7，SKBR3分别筛出109，141，88(8.5%，11.0%，6.9%)种，对三种细胞都有抑制作用的有59（4.6%）种。进行显微注射斑马鱼并暴露59种药，对 MDA-MB-231，MCF-7细胞系里 PROCR+，ABCG2+群有抑制作用的分别有20，18种，对两种都有效的有10种。对这10种药物用第三个细胞系 SKBR3分选出 ALDH1+群进行显微注射，筛选出7种药物有效，分别为替尼泊苷、洋地黄毒苷、吐根碱、氟尿苷、灭缔灵、司拉克丁、嘌呤霉素。 结论：乳腺微球培养和斑马鱼显微注射是有效评价乳腺癌干细胞自我更新、无限增殖、侵袭转移能力的模型。实验筛选出了7种药物能够抑制分别代表 ER-PR-Her2-，ER+PR+Her2-，ER-PR-Her2+的MDA-MB-231，MCF-7，SKBR3细胞系里乳腺癌干细胞生长、增殖或转移。