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胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)是一种重要的植物病原菌,寄主范围十分广泛,给农业生产造成严重的经济损失。目前国内外关于该真菌的研究主要集中在形态、分类、生物学特性、遗传多样性、抗药性、病害防治及与致病基因的鉴定等方面,而胶孢炭疽菌CgbHLH转录因子家族基因在菌丝生长发育、致病分子机理等方面的功能尚不清楚,开展CgbHLH转录因子家族基因功能的解析对病害防治具有重要的生产意义与学术价值。本研究以C.gloeosporioides为研究对象,依据全基因组数据库中CgbHLH转录因子家族基因序列,设计引物PCR扩增获得该基因cDNA全长序列。解析了家族成员间的进化关系、分析基因结构、预测motif结构与数量、亚细胞定位,系统性地分析了CgbHLH转录因子家族基因的生物信息学,发现CgbHLH有典型的WbHLH转录因子家族基因特征,其在烟草细胞中的瞬时表达产物主要定位在细胞核内。采用qRT-PCR方法定量分析了胶孢炭疽菌侵染芒果叶片和果实后及非生物胁迫因子(低温、高温、SDS、NaCl、H202)等处理菌丝后该家族基因的表达情况。结果表明,不同基因在侵染过程中、逆境胁迫下的基因表达量差异明显,其中CgbHLH4和CgbHLHL6在侵染初期高效表达,推测其可能参与了病原菌的侵染调控。通过基因敲除和RNAi方法获得了CgbHLH4 CgbHLHL6的单基因敲除、双基因敲除、单基因RNAi和双基因RNAi的突变体。与野生型A2菌株相比,敲除突变体ΔCgbHLH4不能形成附着胞,产孢能力减弱,菌丝变粗、畸形,孢子变短变粗;突变体ΔCgHLH6的附着孢形成率大幅下降,产孢能力减弱,菌丝畸形,分生孢子细长,抗氧化能力减弱。与野生型A2菌株相比,CgbHLH4的单基因RNAi突变体pSlient-1:CgbH4菌丝变粗,产孢能力减弱,和敲除突变体ΔCgbHLH4基本一致,但附着孢形成率高于敲除突变体ΔCgbHLH4;CgbLH6的单基因RNAi突变体pSlient-1:CgbHLH6的菌丝尖端膨大畸形,和敲除突变体ΔCgbHLH6基本一致;双基因RNAi突变体pSlient-1:CgbHLH4:CgbHLH6菌丝稀疏畸形,但扩散迅速,附着胞形成率大幅下降,与双敲除突变体ΔCgbHLH4:ΔCgbHLH6相似;野生型与突变体对多菌灵的敏感性测定结果表明,突变体对多菌灵的敏感性下降、耐药性提高。通过菌饼接种芒果叶片和成熟果果实,测定了突变体的致病性,结果表明在伤口接种时,以病斑大小判断,除双基因RNAi突变体pSlient-1:CgHLH4:CgbLH6的致病力与野生型A2差异不显著外,其余突变体的致病力明显强于野生型;无伤接种时,突变体的致病力则显著弱于野生型。酵母双杂交实验初步筛选得到5个与CgbHLH4、1个与CgbHLH6互作的蛋白。本论文从生物信息学、分子生物学、细胞学、生理生化等方面,系统地解析了C.gloeosporioides转录因子家族基因CgbHLH的功能,发现该基因家族在菌丝生长发育、分生孢子产生、附着胞形成,逆境适应性、对多菌灵的耐药性和对芒果致病性方面起着重要的调控作用。