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小麦是世界上最重要的粮食作物之一,其加工产品的种类繁多。面筋蛋白是小麦主要的储藏蛋白,很多研究已经证明面筋蛋白中的高分子量麦谷蛋白亚基与小麦的加工品质密切相关,主要决定面团的弹性和粘弹性。
本研究以农大3338和济麦20为材料,进行了高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS),1Bx6和1Bx13基因全长的克隆和分子特征研究。
利用SDS-PAGE对农大3338和济麦20的HMW-GS组成进行分析表明:农大3338中共有4个HMW-GS表达,分别是1Bx6+1By8,1Dx2+1Dy12;济麦20中有5个HMW-GS表达,分别为1Ax1、1Bx13+1Bx16、1Dx5+1Dy10。根据HMW-GS基因编码区的保守序列设计兼并性引物,通过基因组PCR方法首次分离了1Bx6和1Bx13亚基的全长基因L1Bx6、L1Bx13。利用网络资源和生物软件,我们对这两个基因的核酸序列和氨基酸序列进行分析,L1Bx6和L1Bx13亚基同已知的x型高分子量麦谷蛋白亚基同源。
利用基因组PCR方法从农大3338和济麦20中克隆了L1Bx6和L1Bx13启动子序列。序列比对后,我们发现这两个启动子序列与小麦同类基因的启动子具有很高的同源性。这两个启动子序列具有完整的功能结构域。
高分子量麦谷蛋白同小麦品质有密切的关系。因此,为了研究1Bx6和1Bx13对小麦品质的影响,我们测定了农大3338和济麦20的粉质图,沉淀值。通过分析这些参数,可以了解1Bx6、1Bx13同小麦加工品质间的关系。
总之,本研究首次从小麦中克隆出高分子量麦谷蛋白亚基1Bx6和1Bx13的全长,并分析其结构特点,为利用生物工程技术用来改良小麦的面粉品质奠定基础。