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[背景]顺铂是一种临床上广泛使用的抗肿瘤药物,具有细胞毒性,同时也具有耳毒性,能造成不可逆转的感音神经性耳聋。既往研究发现,顺铂能直接导致耳蜗毛细胞的损伤缺失,并且损害血管纹细胞和螺旋神经节神经元。目前尚没有一种药物可以有效预防或治疗毛细胞损伤或丢失导致的听力障碍。毛细胞再生仍然是耳科学及听力学研究领域的难点和热点。毛细胞发育和再生的过程受到多种分子机制的调控,包括Atoh1、Wnt、Notch、FGF、Shh等。STAT3是JAK-STAT信号通路中的重要环节,在许多细胞和组织中都有表达,在调节细胞生长、分化、凋亡、血管生成、代谢及免疫反应等过程中发挥作用。但STAT3在毛细胞再生过程中的作用尚未阐明。斑马鱼基因与人类基因高度同源,其内耳毛细胞及侧线毛细胞均可自发再生。斑马鱼侧线系统具有结构简单、操作容易、观察直观等特点,是一种研究毛细胞损伤及再生的理想模型。有鉴于此,我们利用顺铂建立斑马鱼幼鱼侧线毛细胞损伤及再生模型,并进一步探究STAT3与斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生的相关性。[目的]建立斑马鱼幼鱼侧线毛细胞损伤及再生模型;探究STAT3与斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生的相关性。[方法](1)采用50μmol/L顺铂溶液处理受精后5天(5dpf)斑马鱼幼鱼24小时,以YO-PRO-1和FM1-43FX标记侧线毛细胞,显微镜下观察毛细胞损伤及再生情况。(2)运用斑马鱼整体原位杂交技术检测STAT3基因在侧线毛细胞再生过程的表达。(3)利用STAT3特异性抑制剂APTSTAT3-9处理顺铂损伤后的斑马鱼幼鱼,观察侧线毛细胞再生的变化情况。[结果](1)以500μmol/L顺铂溶液处理受精后5天(5dpf)斑马鱼幼鱼24小时后,YO-PRO-1标记的毛细胞完全消失。而撤除顺铂后6小时、12小时、24小时、48小时,FMI-43FX标记阳性的毛细胞随时间延长而显著增多。(2)STAT3基因在正常5dpf的斑马鱼幼鱼侧线神经丘有表达;撤除顺铂6h的表达与对照组相比明显上升,而撤除顺铂12h的表达低于对照组,达到“谷底”;撤除顺铂24h、48h的表达呈梯度上升,48h时STAT3基因的表达与对照组相仿。(3)APTSTAT3-9R浓度越高,顺铂损伤后斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生数目越少、再生速度越缓慢。[结论](1)以500μmOl/L顺铂溶液浸泡5dpf斑马鱼幼鱼24h,可以完全损伤侧线毛细胞,而毛细胞可自发再生。采用5dpf的斑马鱼建立斑马鱼幼鱼侧线毛细胞损伤及再生模型是可行的。(2)STAT3可能参与了正常斑马鱼侧线毛细胞的功能维持和自我更新。(3)STAT3在维持斑马鱼侧线毛细胞数量的动态平衡中发挥一定作用。(4)STAT3可能对斑马鱼幼鱼侧线毛细胞的再生过程起到正向调控的作用。