P物质对体外培养大鼠肉芽组织成纤维细胞内源性生长因子及其受体的影响

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创伤愈合是一个复杂的过程,作为肉芽组织的主要成分细胞,成纤维细胞在创伤修复进程与结局方面起着重要作用。已知由修复细胞自分泌或旁分泌的生长因子参与了伤口愈合的调控,同时细的有髓鞘Aδ类痛觉纤维和无髓鞘C纤维末梢释放的感觉神经肽P物质(SP)也积极参与了对创伤修复成分细胞的增殖调控和创面愈合过程。我们前期的动物在体实验显示,SP对组织修复起促进作用,该作用可能与创伤修复成分细胞内源性生长因子及其受体的表达有关。为进一步验证这一推测,同时排除在体多因素干扰,我们采用了一种大鼠肉芽组织成纤维细胞体外培养模型,采用RT-PCR与细胞ELISA技术,检测SP刺激成纤维细胞后,成纤维细胞内源性EGF、bFGF、TGFβ-1及其受体基因表达和蛋白合成的改变情况,探讨SP对成纤维细胞内源性生长因子及其受体表达的影响以及方式,以期为经由改善神经功能、调节神经肽分泌途径促进伤口愈合提供理论依据。研究结果表明:①在基因水平,SP刺激成纤维细胞EGF、bFGF、TGFβ-1/R-1/R-2表达的量-效曲线呈双相分布,即由低浓度(10-9M)开始,其效应随浓度升高逐渐增强,达高峰后(10-8M-10-7M),随浓度升高其作用渐降低。但低浓度(10-9M-10-7M)时,SP对成纤维细胞EGFR、FGFR-1表达无显著影响,高浓度(10-6M-10-5M)时可发挥上调效应。另外,SP刺激成纤维细胞内源性EGF、bFGF、TGFβ-1/R-1/R-2表达的时-效曲线表明,其上调EGF、bFGF、TGFβ-1/R-1表达的高峰时间(3h-6h)早于EGFR、FGFR-1、TGFR-2的高峰时间(12h)。②在蛋白质水平,SP对成纤维细胞EGF/EGFR、bFGF/FGFR-1、TGFβ-1/R-1/R-2合成的量-效曲线和最佳浓度基本与基因水平的表现相似,但其高峰作用时间(16h-36h)迟后于相应基<WP=8>因表达的高峰时间。研究结果提示:①SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞内源性生长因子及其受体表达存在直接影响,其表现形式与生长因子及其受体种类、药物刺激剂量和时间有关;②参照文献分析,SP对成纤维细胞内源性生长因子及其受体的影响,可能与它们在受体后信号通路存在交叉,或SP通过调节细胞内花生四烯酸代谢和原癌基因激活等途径,最终影响到成纤维细胞内源性生长因子及其受体的表达有关;③SP对成纤维细胞内源性生长因子及其受体的影响,可能是感觉神经末梢释放的神经肽在创伤修复过程中促进成纤维细胞增殖,以及在组织修复瘢痕化程度方面发挥影响的分子生物学机制。
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