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唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.)为蓼科(Polygonaceae)大黄属(Rheum Linn.)多年生高大草本植物,具有泻下,清热,凉血,解毒等功效,在中药配伍中占重要地位。近年来,由于优质大黄需求量日益增加,唐古特大黄野生资源由于连年采挖无法满足医药方面的需求,人工种植是解决野生资源匮乏的有效手段,而且高原地区唐古特大黄人工栽培现有的田间操作关键技术指导存在不足,本研究基于现有成果,为唐古特大黄栽培的规范化、标准化种植进行补充和完善。 本研究以青海道地药材唐古特大黄为研究对象,采用原产地大田试验的方法,结合在不同采收期,探讨了施肥、覆膜和种植密度对二、三年生唐古特大黄生长及质量标准综合评价的影响。主要研究结果如下: (1)不同磷肥梯度、采收期下,施加磷肥对根鲜、干重及生长量的影响呈正相关。与对照组相比,二年生唐古特大黄根直径和株高施加高水平的磷肥促进作用最为显著,增长量分别为40.79%和44.94%。三年生唐古特大黄在磷肥P3水平下,10月根长度达到最大值(42.32cm/株),与空白、低、中水平磷肥相比,增长量分别为33.84%,5.35%,8.01%,而且根鲜、干重最大值分别为567.61g/株和230.08g/株,与对照相比,增长量分别为44.02%和58.57%。 (2)不同钾肥梯度对二年生唐古特大黄的根长度、根直径及株高的影喃呈正相关;不同采收期对生长及产量的影响为:10月>7月>5月。二年及三年生唐古特大黄的最长根长在10月施加低水平钾肥时获得,分别为34.69cm和43.74cm。三年生唐古特大黄在5月和7月,三个水平施肥组的根鲜重、根干重和根生长量呈现先降低再升高的“V”型变化趋势。最大根鲜重、干重及生长量于10月K1水平时获得,分别为714.53g/株、261.03g/株和697.26g/株。 (3)相同条件下对比四种不同的反相色谱柱,对蒽醌类化合物的分离效果,以色谱峰的分辨率、保留时间和选择性作为标准,Unitary C18呈现最优的分析图谱。 (4)二、三年生唐古特大黄蒽醌化合物含量均符合2015版《中华人民共和国药典》标准,施肥的蒽醌含量低于对照。施加磷肥二、三年生唐古特大黄的蒽醌化合物平均含量为22.21mg/g和33.69mg/g;施加钾肥三年生唐古特大黄的蒽醌化合物平均含量(37.68mg/g)约为二年生的1.74倍。大黄根部蕙醌含量及番泻昔含量随采收期呈“V”型变化。随着生长年限的增加番泻苷的含量也随之增加,二、三年生唐古特大黄总番泻苷含量比一年生的高103.81%和2.54%。鞣质类化合物的含量随着采收期的变化趋势为:5月>7月>10月。5月采收的施加钾肥的二年生唐古特大黄没食子酸含有量达到最大值1.43mg/g,为10月的0.24倍;施加磷肥三年生唐古特大黄5月儿茶素平均含量最高(38.78mg/g),分别为7月和10月的0.40倍和1.31倍。 (5)本研究增加番泻苷类和鞣质类化合物含量作为辅助测定指标,二、三年生唐古特大黄番泻苷的总含量变化为2.59mg/g~8.57mg/g;没食子酸的含量变化为0.67mg/g~2.03mg/g;儿茶素的含量变化为10.07mg/g~46.31mg/g。 (6)唐古特大黄在露天、白膜、黑膜下生长及质量均有不同的差异,唐古特大黄在黑膜下长势及根产量最优,其次为白膜,露地下最小。黑膜下平均根鲜重为1276.5g,黑膜下植株鲜重为白膜的1.34倍,为露地的2.72倍。露地和黑膜下一年生唐古特大黄的平均总蒽醌含量(分别为17.41mg/g和15.37mg/g)均符合药典标准。 (7)在同一年中,随着种植密度的减小,唐古特大黄的单株根鲜、干重以及生长量增加显著,单位面积产量随之减小。株距为50cm时,三年生唐古特大黄根长度、直径达到最大值,分别为42.07cm/株和5.04cm/株;10月时唐古特大黄的生长及产量最优,株距为50cm时个体指标和产量都已达到最大值。株距为40cm时三年生唐古特大黄的根鲜重达636.7g,为二年生的3.77倍。10月采收的三年生唐古特大黄,株距为30cm时单位面积产量为285883kg/hm2,为同年生7月产量的0.17倍,为10月二年生唐古特大黄的0.42倍。