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导致丙型病毒性肝炎的致病因子是丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）。据世界卫生组织最新数据统计，全世界估计约1亿8千万人感染HCV。HCV感染的一个重要特征就是易致慢性化。但到目前为止，丙肝的预防仍无有效的方法。HCV在我国主要经血液或血制品传播，但近年来加强对献血员进行HCV筛检使输血后感染HCV大为降低。现已证实HCV存在母婴传播（mother-to-infanttransmission,MIT），因而HCV母婴传播已成为研究热点，但其具体传播分子机制目前尚不十分清楚。 滋养层细胞是胎盘屏障的第一层细胞，HCV经胎盘感染胎儿必须突破此细胞层。已有研究发现HCV病毒包膜糖蛋白E1/E2结合靶细胞表面受体后，病毒与靶细胞膜融合，引起靶细胞感染。母婴传播中HCV如何与靶细胞上受体结合的具体机制仍不清楚。因此深入研究HCV的受体及相关辅受体，对了解HCV致病机制至关重要。 研究表明，树突状细胞（dendriticcell，DC）作为HCV转染细胞之一，其表面的树突状细胞特异性细胞间粘附分子-3结合非整合素因子即CLEC4L可与HCV的包膜糖蛋白E1/E2结合，介导病毒内化，感染靶细胞。在HCV母婴传播过程中是否也具有与以上病毒相似的分子机制，目前尚不完全清楚。 为探讨在母婴传播中HCV如何与人滋养层细胞相互作用本研究进行了如下工作： 1、通过改良后的分离纯化法获得纯度较高的滋养层细胞，应用HCVRNA阳性血清进行体外感染，通过细胞裂解液裂解感染后细胞，经荧光RT-PCR技术检测感染后细胞培养上清和细胞内的HCVRNA，以观察HCV的感染及复制情况。经免疫荧光染色感染后48h滋养层细胞细胞浆中可见HCVNS5表达，分别于感染后24、48、72、96、120h收集的培养上清和感染后细胞内均可以检测到HCVRNA。HCVRNA阳性血清能在体外感染原代培养的人滋养层细胞，且HCV可在滋养层细胞中复制，为HCV母婴传播途径提供了形态学支持。 2、免疫组化染色、免疫荧光方法观察CLEC4L在不同孕期胎盘绒毛组织及人滋养层细胞的定位与分布，为进一步研究母婴传播分子机制提供细胞形态学基础。 3、设CLEC4L单抗组、甘露聚糖组和对照组研究CLEC4L介导HCV感染人胎盘滋养层细胞的情况。经RT-PCR法检测HCV感染后细胞内HCVRNA含量，结果显示CLEL4L单抗组细胞内HCVRNA水平较低，甘露聚糖组显示类似结果。可见CLEC4L能够介导HCV进入人胎盘滋养层细胞，CLEC4L单抗和甘露聚糖对HCV与人滋养层细胞的结合有一定阻断作用。