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猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)病是当今危害养殖业的重要的细菌性传染病之一。不同群的链球菌可引起的猪的不同临床症状,表现为猪脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎、多发性浆膜炎和局部脓肿,同时2型猪链球菌还可导致生猪从业人员感染和死亡,是一种重要的人畜共患病病原。抗菌药物在预防和治疗猪链球菌病过程中起着重要的作用,但在临床中经常出现抗菌药治疗无效的情况。本实验对我国广东省地区猪链球菌耐药性及分子流行病学进行研究,为广东省猪链球菌的防治提供科学依据。 本研究从2010-2012年间广东省不同地区分离得到的56株猪链球菌开展了以下工作。 本研究采用K-B(kir by Bauer)纸片法检测从广东省广州、佛山、茂名、韶关、江门、惠州、东莞等地区分离的56株猪链球菌对18种抗生素的耐药性。结果表明56株猪链球菌对氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、萘啶酸等喹诺酮类药物的耐药率为21.4%-71.4%,对青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、头孢曲松、头孢拉定、头孢噻肟等β-内酰胺类药物的耐药率为23.2%-98.2%,对四环素药物耐药率为98.2%,对链霉素、卡那霉素等氨基糖苷类药物的耐药率为66.1%-73.2%,对红霉素等大环内酯类药物的耐药率为64.3%,对氯霉素耐药率为66.1%,对磺胺甲噁唑、复方新诺明、甲氧苄啶等磺胺类药物的耐药率为67.9%-80.4%。本研究发现不同区域的菌株对抗菌药物的耐药性有一定的差异。2010年-2012年广东省地区猪链球菌的耐药性总体上呈现逐年上升的趋势。 本研究根据药敏试验结果得出的较敏感药物中选出10种抗生素进行最低抑菌浓度(MIC)试验,用于指导广东省地区猪链球菌病的防控。结果表明选用头孢噻肟、头孢曲松、头孢拉定、环丙沙星、恩诺沙星用药量少,对于当前的猪链球菌的防控有一定的作用。 本研究根据广东省不同地区统计分析的多重耐药情况,发现多重耐药普遍存在,以6耐、14耐药为主,并且同时对磺胺、红霉素、四环素和链霉素四种药物耐药的菌株在4耐以上的菌株中占主体地位。 本研究选取大环内酯类(ermA、ermB、ermC、mefA、msrA/B、ermTR、ereA、ereB、mphA、mphC)、四环素类(tetM、tetC、tetO、tetK、tetL)、喹诺酮类(gyrA、parC)、氨基糖苷类(APH3’)的耐药基因扩增引物对56株猪链球菌进行检测发现在耐药表型和耐药基因符合率最高的为四环素类,符合率为98.21%。氨基糖苷类符合率为76.92%,大环内酯类符合率为64.29%,喹诺酮类符合率为48.21%。 本研究将检出的耐药基因进行测序并用软件进行分析,分析广东省不同地区的相似性关系,探讨其可能的耐药传播机制。 综上所述,本研究分析了2010-2012年广东省56株不同地区猪链球菌对常用的18种抗生素的耐药情况,反映了广东省猪链球菌耐药的普遍性和严重性,对猪链球菌的治疗与预防用药具有一定的参考价值。对部分耐药基因检测分析,探讨猪链球菌可能的耐药基因分子流行病学规律,为猪链球菌病的预防和治疗提供一些理论依据。