骨髓增生异常综合征细胞凋亡的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Fukuki
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目的: 骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)主要表现为外周血全血细胞减少,而骨髓造血细胞增生活跃;易转为急性髓性白血病(acutemyeloid leukemia,AML)。凋亡是细胞主动死亡的过程,参与肿瘤的发生;它由细胞外环境因素触发,并受严格调控。TNF-α在体内外均可抑制造血。本研究对MDS骨髓细胞凋亡水平进行了检测,并观察在MDS向AML进展过程中的变化,分析凋亡在其中的作用;同时检测MDS骨髓细胞bcl-2、bax表达水平及患者血清TNF-α浓度,探讨MDS骨髓细胞凋亡的调控和诱发因素。 方法: 本研究用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminaldeoxytransferase-mediated nick end labeling,TUNEL)法检测MDS、post-MDSAML、de novo AML患者及正常对照骨髓单个核细胞(bone marrow mononu-clear cells,BMNCs)的凋亡水平;并用流式细胞仪对其中部分患者和正常对照BMNCs短期(4小时,4h)培养前后的凋亡率进行了检测。上述患者及正常对照BMNCs的bax和bcl-2蛋白水平用间接免疫酶标ABC法检测。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoso-binant assay,ELISA)用以测定血清TNF-α浓度。取自同一肋骨的正常BMNCs与5%或10%MDS患者或正常对照血清分别培养24小时后,检测其凋亡率。 结果: 1.低危与高危MDS间、MDS各亚型间、及MDS与post-MDS AML间凋亡率及平均bax/bcl-2积分比的差异均无显著性(p>0.05)。 2.MDS、post-MDS AML与de novo AML、正常对照间BMNCs凋亡率差异,除流式细胞仪检测post-MDS AML、de novo AML两者间未经培养BMNCs(0小时,0h)的外,均有显著差异(p<0.05)。 3.MDS、post-MDS AML与de novo AML、正常对照间bax/bcl-2积分比差异没有显著性(p>0.05)。 4.MDS、post-MDS AML、正常对照、de novo AML的TUNEL阳性率与bax/bcl-2积分比之间的相关系数r=0.60(p<0.01)。流式细胞仪检测到的0h和4h BMNCs凋亡率与bax/bcl-2积分比的相关系数分别为0.43和0.48(p值均小于0.05)。
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