【摘 要】
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目的:建立小鼠致敏模型,通过观察TLR2基因敲除小鼠肺组织STAT3表达及炎症指标的改变,探讨TLR2-STAT3通路在过敏性炎症发病机制中的作用。方法:1.实验小鼠分为四组,每组5只,C5
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目的:建立小鼠致敏模型,通过观察TLR2基因敲除小鼠肺组织STAT3表达及炎症指标的改变,探讨TLR2-STAT3通路在过敏性炎症发病机制中的作用。方法:1.实验小鼠分为四组,每组5只,C57Bl/6 OVA组及TLR2-/-OVA组小鼠在第0天和第7天分别腹腔注射OVA致敏液建立致敏模型,C57Bl/6 NS组及TLR2-/-NS组予生理盐水腹腔注射建立对照模型,注射部位、时间及剂量均与前两组相同。2.HE染色观察肺组织细支气管周围炎症细胞浸润情况,肺泡灌洗液细胞分类计数观察各类炎症细胞的变化。3.采用ELISA检测外周血中Mouse OVA-IgE,IgA,IgM,IgG1,IgG2a及IgG2b表达水平。4.采用Real-Time PCR检测肺组织中IL-4、IL-5及IL-13 mRNA表达水平。5.分别采用免疫组化及免疫荧光方法检测肺组织中STAT3及NF-κB的蛋白表达水平。6.C57Bl/6小鼠致敏前腹腔注射CPT,剂量为200mg/kg/d,观察CPT对致敏小鼠STAT3、NF-κB及IgG1表达及肺组织炎症细胞浸润的影响。结果:1.采用卵白蛋白腹腔注射成功建立了小鼠致敏模型,C57Bl/6小鼠致敏后气道周围炎症细胞浸润明显,肺泡灌洗液中巨噬细胞比例下降,嗜酸性粒细胞比例上升,肺组织中IL-4及IL-13 mRNA表达明显上调,血清IgG1、IgA、IgG2a、IgG2b、IgM及IgE表达均明显上升,以上差异均有统计学意义(p?0.05)。2.TLR2-/-OVA小鼠与C57Bl/6 OVA小鼠相比,气管及细支气管周围炎症细胞浸润减轻,肺组织中IL-4 mRNA及IL-13 mRNA表达水平下调,外周血Mouse OVA-IgE表达水平上升,IgG1表达水平下降,肺组织中STAT3蛋白表达下调,以上差异均有统计学意义(p?0.05),而NF-κB的表达无改变。3.CPT干预后致敏小鼠肺组织中STAT3蛋白表达水平下调,外周血Mouse OVA-IgG1浓度下降,差异有统计学意义(p?0.05),气管及细支气管周围炎症细胞浸润减轻,而肺组织中NF-κB的蛋白表达无改变。结论:1.TLR2通过STAT3调控IgG1的表达从而促进OVA致敏后引起的Th2类炎症反应。2.CPT可通过抑制TLR2-STAT3通路有效下调外周血中IgG1浓度,并且减轻致敏小鼠肺组织中炎症细胞浸润。
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