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目的：研究在中国汉族人群中一些散发性阿尔茨海默病(AD)的易感性基因多态性的分布,探讨其与AD的关系,为更详尽的了解AD潜在的发病机制提供分子流行病学依据,并为AD的早期诊断和治疗提供更多的分子生物学指标。
方法：采用病例-对照研究的方法,应用聚合酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测106例散发性AD患者和110例健康对照者六个基因多态性位点:ApoE、tPAAluI/D和BDNF 196G/A、270C/T、11757G/C和712G/A的单核苷酸多态性(SNP)在中国汉族人群中的分布,并通过比值比(Odds Ratio, OR)作疾病关联分析。采用SHEsis软件对BDNF基因4个SNPs进行连锁不平衡和单体型分析。
结果：
1.ApoE基因多态性的检测及其与AD的相关性分析:AD组与对照组ApoE各基因型分布差异有统计学意义(χ2=37.297, P=0.000),AD组携带ApoEε4等位基因者明显高于健康对照组(42.5％和19.1％; χ2=13.885, P=0.000),其OR值为3.126(95％CI=1.696～5.765);AD组携带ApoEε2等位基因者明显低于健康对照组(7.5％和36.4％; χ2=25.935, P=0.000),其OR值为0.143(95％CI=0.063～0.324)。进一步将样本按性别分层后发现,ApoEε4携带者在女性中差异有统计学意义(P=0.001)。另外,ApoEε4等位基因与发病年龄和疾病的严重程度无统计学意义(P>0.05)。
2.tPA AluI/D基因多态性的检测及其与AD的相关性分析:AD组与对照组基因型频率(χ2=5.795,P=0.055)差异无统计学意义,AD组tPA AluI等位基因频率明显高于健康对照组(59.4％和48.6％; χ2=5.066, P=0.024),其OR值为1.547(95％CI=1.057～2.264.)。进一步将样本按发病年龄和性别分层,未发现差异有统计学意义(P>0.05),另外,各基因型与发病年龄和疾病的严重程度无统计学意义(P>0.05)。
3.BDNF 196G/A、270C/T、11757G/C和712G/A多态性的检测及其与AD的相关性分析：
(1)BDNF 196G/A多态性的检测及其与AD的相关性分析:AD组和对照组基因型频率(χ2=0.291, P=0.865)和等位基因频率(χ2=0.000,P=0.994)差异均无统计学意义。进一步将样本按发病年龄和性别分层,也未发现差异存在统计学意义(P>0.05)。另外,各基因型与发病年龄和疾病的严重程度无统计学意义(P>0.05)。
(2)BDNF 270C/T多态性的检测及其与AD的相关性分析:AD组和对照组基因型频率分布差异无统计学意义(χ2=4.571, P=0.102)。AD组270T等位基因频率显著低于健康对照组(0.9％和4.5％; χ2=5.187, P=0.036),其OR值为0.200(95％CI=0.043～0.924)。
(3)BDNF 11757G/C多态性的检测及其与AD的相关性分析:AD组和对照组基因型频率(χ2=0.286, P=0.867)和等位基因频率(χ2=0.000, P=0.991)差异无统计学意义。进一步将样本按发病年龄和性别分层,也未发现差异存在统计学意义(P>0.05)。另外,各基因型与发病年龄和疾病的严重程度无统计学意义(P>0.05)。
(4)BDNF 712G/A多态性的检测及其与AD的相关性分析:AD组和对照组基因型频率(χ2=6.450, P=0.040)差异有统计学意义。AD组712A等位基因频率显著低于健康对照组(0.5％和4.5％；χ2=7.220, P=0.011),其OR值为0.100 (95％CI=0.013～0.784)。
(5)BDNF单体型、双体型分析及其与AD的相关性分析：与对照组相比,单体型270C-11757G在AD组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);AD组单体型196G-712A、270T-11757G、11757G-712A、196G-270T-11757G、196G-11757G-712A、270T-11757G-712A和196G-270T-11757G-712A频率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。按ApoEε4分层后发现,在非ApoEε4携带者中,与对照组相比,AD组单体型196G-11757G-712A频率(χ2=4.787, P=0.029)显著降低,差异有统计学意义,其OR值为0.961(95％(CI=0.933～0.990);而在ApoEε4携带者中差异无统计学意义。在BDNF 196G/A、11757G/C和712G/A多态性之间组合的单体型基础上进行双体型分析,与对照组相比,单体型196A-11757C-712G和单体型196G-11757G-712A组合的双体型频率在AD组显著降低(χ2=5.947, P=0.029),差异有统计学意义,其OR值为0.945(95％CI=0.904～0.989)。但这些保护或危险效应应该被谨慎地看待,因为在我们的样本中携带270T和712A这两个等位基因的个体数量少。4.ApoE、tPAAluI/D、BDNF 196G/A和BDNF 11757G/C之间交互作用的分析:AD组ApoEε4等位基因频率显著高于对照组(P>0.05),且与tPAAluI等位基因、BDNF 196G等位基因、BDNF 11757G等位基因之间存在交互作用,其OR值分别为4.988(95％CI=1.923～12.935)、2.674 (95％CI=1.133～6.312)和2.625(95％CI=1.109～6.216),P值分别为0.001、0.023和0.027。tPA AluI等位基因与BDNF 196G/A之间不存在交互作用,P>0.05。
结论：
1.ApoE基因：中国汉族人群中ApoE基因SNP与AD存在相关性,ApoEε4等位基因可能是AD的危险因素,ApoEε2等位基因可能是AD的保护因素。
2.tPA AluI/D位点：中国汉族人群中tPA AluI/D位点SNP与AD存在相关性,AluI等位基因可能是AD的危险因素。
3.BDNF基因：中国汉族人群中BDNF 196G/A位点SNP与AD无关联；BDNF 270C/T位点SNP与AD存在相关性,T等位基因可能是AD的保护因素；BDNF 11757G/C位点SNP与AD无关联；BDNF 712G/A位点SNP与AD存在相关性,A等位基因可能是AD的保护因素；单体型270C-712G可能是AD的危险因素,而196G-712A、270T-11757G、11757G-712A、 196G-270T-11757G、 196G-11757G-712A、 270T-11757G-712A和196G-270T-11757G-712A等单体型均可能是AD的保护因素；在非ApoEε4携带者中,BDNF196G/A、11757G/C和712G/A之间组合的单体型GGA可能是AD的保护因素；BDNF196G/A、11757G/C和712G/A SNP之间组合的双体型ACG-GGA可能是AD的保护因素；
4.tPA AluI等位基因、BDNF 196G等何基因、BDNF 11757G等位基因均与ApoEε4等位基因存在协同交互作用；tPA AluI等位基因与BDNF 196G等位基因之间不存在交互作用。